线粒体红色荧光染色试剂盒-M01

特别提示：包括线粒体红色荧光染色试剂盒-M01在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：线粒体红色荧光染色试剂盒-M01
产品货号：HR8359
产品规格：1000T/2000T

M11线粒体染色试剂盒是利用M 系列探针进行线粒体特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的M11线粒体染色探针为红色荧光标记的线粒体探针，具有579/599nm的最大激发/发射波长。本品适合双标实验，因其红色荧光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。
M系列探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料，该系列探针可以选择性标记线粒体，包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞，即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。可有效标记活细胞。一旦线粒体被染色后，还能根据后续实验的需求进行固定(醛类固定剂如甲醛)和透化(醛类去污剂如Triton X-100)，探针依然维持在细胞内。
虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123，也能很容易的聚集在功能线粒体上，但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉，从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中，使其应用大受限制，而M 系列探针不受线粒体膜电位影响。
M系列线粒体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的红色荧光探针，我公司还可以提供绿色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。

储存条件：染料-20℃避光保存；避免反复冻融；稀释液2-8℃保存。
有效期：六个月。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● HBSS ●离心机 ●荧光显微镜/激光共聚焦显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● M11染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
●染色后立即进行分析。

1．染色工作液配制：
根据样本数量，用染料稀释液将M11荧光染料100倍稀释，再用相应的培养基或者HBSS缓冲液20-400倍稀释(对于后续需要做固定或透化的样本，20-100倍稀释)，配制成染色工作液。
【注】:
● 也可以直接用相应的培养基或HBSS等缓冲液稀释M11染料母液至所需浓度。
● 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光冻存，一年稳定。
● 开始实验前，使用培养基或HBSS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。工作浓度为根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度，一般染色终浓度2000-40000倍稀释。
● 为了降低过度加载染料导致的潜在背景和线粒体毒性，在不影响实验结果的前提下应尽可能低浓度染色。另外，浓度过高也可能造成非特异性染色，对其他细胞结构进行染色。
● 工作液现配现用。
● 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
2．细胞染色
2.1对于贴壁细胞
1)培养皿/培养板准备细胞样本。
2)待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育15分钟～45分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化)。
【注】:
● 也可以将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液。
【注】:
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
4)荧光显微镜(含合适滤片)或流式细胞仪、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射波长为579 / 599nm。或者进行后续的固定和透化步骤。
2.2对于悬浮细胞
1)离心，吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30分钟～2小时(具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化)。
3)离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为579/599nm。或者进行后续的固定和透化步骤。
【注】:
●对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
● 如果需要盖玻片上固定化的细胞，那么可在铺片前可以先用多聚赖氨酸(poly-D-lysine)包被载玻片或盖玻片。
● 若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
3．固定和透化：
1)染色结束后，利用培养液或缓冲液清洗细胞；
2)小心吸走清洗液。换用新鲜配制且预热的含2-4%甲醛的缓冲液或培养液进行细胞固定。
3)清洗细胞：吸除固定液，用适当缓冲液冲洗细胞数次。
4)细胞透化(可选)：
ICC等实验需要细胞要做透化，可将已固定的细胞直接加入含有去污剂如Triton X-100的缓冲液中孵育。透化结束后，用缓冲液清洗细胞即可进行后续ICC 实验。
一般用含0.2% Triton X-100的PBS孵育细胞10分钟可以达到良好的透化效果。
还可利用预冷的*酮透化5分钟，之后用PBS清洗细胞。经验证，即使后继没有进一步的抗体标记，*酮透化处理也可降低背景信号。

除了线粒体红色荧光染色试剂盒-M01,，我公司还供应以下相关产品：



名称：无毒环保脱蜡剂
货号：SNM334
规格：500ml

名称：细胞固定/破膜试剂盒
货号：HR0573
规格：200ml
固定液、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定液起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用；破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时，对待测细胞进行固定、破膜处理后，加入相应抗体或检测试剂，孵育一定时间即可上机分析。

储存条件：4℃避光保存，勿冰冻。
有效期：一年。

使用方法：
1．收获待测细胞，1000 rpm离心10分钟，弃上清;
2．加入500μl预冷的固定液;
3．室温孵育10分钟;
4．1000 rpm离心10分钟;
5．弃上清，加入PBS洗一次，1000rpm离心10分钟;
6．弃上清，加入1.5 ml破膜剂;
7．室温孵育10-15分钟;
8．1000 rpm离心5分钟;
9．弃上清，加入适量破膜剂重悬细胞;
10．加入检测抗体进行染色后，用流式细胞仪进行分析。

名称：细胞骨架染色试剂盒(蓝色)-C13
货号：HR8579
规格：500T

名称：0.1% Luxol坚牢蓝溶液(95%酒精)
货号：BTN160268
规格：250mL

名称：Thomas苏木*染色液
货号：BTN160279
规格：100ml

名称：芽孢染色试剂盒
货号：BTN140254
规格：2×250mL

名称：AO染色液(1mg/ml)
货号：GL0329
规格：10ml
用途：
流式细胞术检测细胞DNA含量，通过染色定量分析DNA，亦可通过荧光显微镜观察形态变化。

注意事项：
AO(Acridine Orange)在低浓度下与DNA结合较佳，工作浓度8.5ug/ml

储存条件：4℃，避光，12个月

名称：中性红染色液(液泡系专用)
货号：GL0354
规格：100ml
用途：
用于细胞中液泡系的活体染色

注意事项：
液泡系包括高尔基复合体、溶酶体、内质网、转运泡、吞噬泡等。中性红是液泡系的专一活性染色剂，在细胞处于生活状态时，只将液泡系染成红色，细胞质和细胞核不被染色。

储存条件：室温，12个月

名称：酸性固绿染色液
货号：GL0411
规格：2×50ml
用途：
显示细胞中碱性蛋白，尤其是组蛋白

储存条件：室温，避光，12个月

名称：软骨染色液(阿利新蓝法,pH2.5)
货号：GL0413
规格：2×50ml
用途：
软骨染色，主要显示羟基酸性粘液物质

注意事项：
主要由酸化液、Alcian 染色液(PH2.5)组成。染色结果为：酸性黏蛋白呈蓝色，细胞核呈浅蓝色。

储存条件：4℃，避光，12个月

名称：Thomas磷钼酸苏木素染色液
货号：GL0424
规格：2×100ml
用途：
胶原、网状纤维

注意事项：
含分化液，胶原、粗网状纤维呈紫色至黑色、嗜银细胞颗粒呈黑色。

储存条件：室温，避光，12个月

名称：核固红染色液(0.1%)
货号：GL0450
规格：100ml
用途：
细胞核、网状纤维染色，常用于复染

注意事项：
主要由核固红、去离子水组成。

储存条件：室温，避光，12个月

名称：磷钼酸水溶液(1%)
货号：GL0452
规格：100ml
用途：
胶原纤维染色，或其他染色液的辅助染料

注意事项：
主要由磷钼酸、去离子水组成。

储存条件：室温，避光，12个月

名称：Perenyi"s脱钙液
货号：GL0459
规格：500ml
用途：
温和脱钙液，组织脱钙，尤其适用于免疫组化

注意事项：
固定后对细胞核和细胞浆细微结构着色好。

储存条件：室温，12个月

名称：蔗糖-PBS溶液(20%)
货号：GL0479
规格：500ml
用途：
新鲜组织取材后，沉淀以去除多余水分，避免冷冻后产生冰晶

注意事项：
主要由蔗糖、PBS、防腐剂组成。

储存条件：4℃，6个月

名称：细胞色素氧化酶染色液(对苯二铵法)
货号：GL0497
规格：4×50ml
用途：
细胞色素氧化酶染色

注意事项：
主要由Co孵育液、Lugol碘液、硫代硫酸钠溶液、钴盐溶液、阴性对照等组成，染色后酶活性部位呈棕绿色。

储存条件：4℃，避光，6个月

名称：伊红染色液(水溶,0.5%)
货号：GL2624
规格：100ml|500ml
用途：
又称曙红染色液，常规切片HE染色

注意事项：
主要由伊红、防腐剂等组成。

储存条件：室温，12个月

名称：TTC染色液(1%)
货号：GL0779
规格：50ml|100ml
用途：
尸检中的新鲜心脏组织和脑组织以及实验动物模型早期梗死组织的染色，测定脑梗死灶体积

注意事项：
TTC与正常组织中的呼吸酶反应而呈红色，而缺血组织内呼吸酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白色。

储存条件：4℃，避光，6个月

名称：核仁组成区嗜银蛋白染色液(AgNOR Stain)
货号：GL0796
规格：2×50ml
用途：
核仁组成区的银染色NOR相关蛋白染色，即AgNOR蛋白位点染色

注意事项：
AgNOR位点呈黑色点状，工作夜易退化，不易保存。

储存条件：4℃，避光，12个月

名称：油红O*丙醇饱和液
货号：GL0804
规格：100ml
用途：
脂肪/脂滴染色

注意事项：
主要由油红O、*丙醇组成，染色后脂滴呈橘红色。

储存条件：室温，24个月

名称：抗酸染色液(Kinyoun冷染法)
货号：GL0853
规格：3×50ml|3×100ml
用途：
抗酸菌(结核杆菌等)染色，可鉴别抗酸菌与非抗酸菌

注意事项：
抗酸菌染色中leagene公司推荐采用该染色液。经典抗酸菌染色法，结果为：抗酸杆菌/结核杆菌呈红色，非抗酸杆菌和背景呈蓝色。主要由*炭酸复红液、脱色液、亚甲蓝复染液组成。

储存条件：室温，避光，12个月

名称：麻风杆菌染色液(改良Wade-Fite法)
货号：GL0889
规格：3×50ml
用途：
抗酸菌染色，特别适用于麻风杆菌染色

注意事项：
抗酸菌(麻风杆菌，结核杆菌)染色呈红色，胞核呈蓝色

储存条件：室温，避光，6个月

名称：詹纳斯绿B染色液(0.5%)
货号：GL0920
规格：10ml
用途：
线粒体染色、肥大细胞染色等

注意事项：
呈不同程度的绿色

储存条件：4℃，避光，12个月

名称：*酸银AGN水溶液(10%)
货号：GL0952
规格：100ml
用途：
组织切片染色

注意事项：
玻璃器皿需要侵泡并清洗干净、烘干。

储存条件：4℃，避光，6个月

名称：皂化液
货号：GL0964
规格：100ml
用途：
碱性溶液裂解耐酶唾液酸中的O-乙酰基

储存条件：室温，12个月