NBRIP-P培养基

原代细胞培养注意事项有哪些？

在细胞生物学领域，原代细胞培养作为解开生命奥秘的重要工具，要求实验者遵循一系列关键的注意事项以确保可靠的实验结果。   本文将深入探讨如何在原代细胞培养过程中应用这些关键要点：   原代培养要重点注意无菌操作，所用器械需提前高压灭菌； 鼠胚原代培养时，获取组织较少，建议在冷光源体视显微镜下操作； 原代细胞培养过程比较慢，培养时间最少需要一周的时间。若 2 天后可能会出现培养基变黄的现象，且无漂浮物，排除污染，属于正常现象。这是因为细胞在贴壁生长过程中释放了 CO2 和其他物质导致培养液 PH

MEF细胞（小鼠胚胎成纤维细胞）培养保姆级SOP及注意事项

，细胞密度约1×10⁶-5×10⁶/mL。 4.【冻存】每管1mL入冻存盒，-80℃过夜后转移至液氮气相长期保存。注意：-70℃存放会导致活力丧失，不可长期置于-80℃。 注意：原代MEF每代都很宝贵，P0-P2应大量冻存建立种子库，之后所有使用都从种子库逐级扩增。 四、关键注意事项 1.培养基与血清 （1）标准配方为DMEM高糖 + 10% FBS，可补加L-谷氨酰胺（abs9354-100ml）与非必需氨基酸（NEAA）（SH30238.01）； （2）MEF对血清质量敏感，建议固定批号并使用

V-P实验结果因何被误判

山西省阳泉市疾病预防控制中心 潘盂泉 目前，一些V-P培养基的生产厂家提供的对实验结果判定说明是接种细菌于37℃培养24h，滴加V-P甲、乙液后在30min内观察结果，变红色为实验阳性，不变色为阴性。然而在实际工作中，笔者发现此方法会造成一些实验结果的误判，并不是所有的细菌都适用上述判定方法。 V-P实验常用于细菌检测，可检验细菌利用葡萄糖产生中性乙酰甲基甲醇的能力，在碱性环境下，乙酰甲基甲醇被空气中氧气氧化成二乙酰，二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含有的胍