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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
34
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃或-80℃
- 规格:
50 次
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
SDS-PAGE 样品制备试剂盒50 次规格介绍:

SDS-PAGE 样品制备试剂盒50 次规格存新鲜组织样品:
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积(1g 组织需 10 mL) RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
SDS-PAGE 样品制备试剂盒50 次规格服务流程:
1)客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作
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Goat Anti-Bovine IgG/Gold 胶体金标记的羊抗牛IgG规格: 0.5ml
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大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1
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人海马神经元
大鼠肾管状上皮细胞完全培养基 100mL
人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF
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文献和实验一. 实验原理: SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后,电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。 二. 试剂和器材: 试剂:1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L
染色液:称100mg考马斯亮蓝G250,溶于200ml蒸馏水中,慢慢加入7.5ml 70%的过氯酸,最后补足水到250ml,搅拌1小时,小孔滤纸过滤。SDS-PAGE凝胶的有效分离范围丙烯酰胺浓度(%) 15 12.5 10 7.5 5.0线性分离范围 15-435kDa 15-60kDa 18-75kDa 30-120 kDa 60-212 kDa器材电泳仪,电泳槽,水浴锅,摇床。样品制备
可见;3. ddH2O 洗 3-5 次。 三、胶体考马氏亮蓝染色 ColloidalCoomassie Staining(Cambridgecentrefor porteomics) sensitivity = ~100ng 1. 固定:甲醇/ 醋酸/H2O(45:1:54)至少 20min. 2. 染色 12-18hr。 染色液: 17% (w/v) 硫酸铵;34%甲醇;0.5%醋酸;0.1% (w/v) CoomassieG250。 3. 脱色:用 H2O 脱色至蛋白点和背景清晰.
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