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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
54
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃或-80℃
- 规格:
100mL

RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL品牌存新鲜组织样品:
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积(1g 组织需 10 mL) RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL品牌服务流程:
1)客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作
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Dog IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗犬IgM抗体规格: 0.1ml
MUSK 肌肉骨骼受体酪氨酸激酶抗体规格: 0.1ml
PML/TRIM19 早幼粒细胞白病蛋白抗体规格: 0.2ml
IFI78/MX1 干扰素诱导蛋白P78抗体规格: 0.1ml
phospho-CYLD(Ser418) 磷酸化微管结合蛋白CYLD抗体规格: 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy7 Cy7标记的驴抗豚鼠IgG规格: 0.1ml
FAM13B1 FAM13B1蛋白抗体规格: 0.2ml
Gliomedin/COLM 神经胶质蛋白(肝相关基因2)抗体规格: 0.2mlCOLEC10(liver) 凝集蛋白家族10抗体(肝)规格: 0.2ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗豚鼠IgG规格: 0.1mlAlpha s1 Casein α-s1酪蛋白抗体规格: 0.2ml
MAG-a/b 髓鞘相关糖蛋白a/b抗体规格: 0.1ml
DRAK1/STK17A 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶17A抗体(DAP凋亡诱导蛋白激酶1)规格: 0.2ml
RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL品牌非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B
水解酪蛋白胨(MH)琼脂 250g
大鼠角膜上皮细胞完全培养基 100mL
弧菌显色培养基选择性添加剂冻干试剂 10支 每支添加于100ml(CRM008)弧菌显色培养基中。
C2C12, 小鼠肌原细胞
人输尿管上皮细胞完全培养基 100mL
小香猪皮肤细胞;SSC-S2
大鼠骨骼肌成肌细胞;L6
人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77
人肺成纤维细胞;HFL1
RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL品牌实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g (1%)0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml (1%)Aprotinin
细胞凋亡是一种在基因控制下的细胞主动死亡过程,通常表现为核浓缩,起皱,膜发泡以及 DNA 片段化。WB 是研究细胞凋亡机理的基本方法之一,但是 WB 也不是谁都能做成功的,因为有可能你的第一步就做错了!用 WB 做细胞凋亡研究样品制备是第一步,样品制备方法至关重要否则会得到错误的结果和结论。样品制备,看你是不是这样做的:自配裂解液或者购买 RIPA,加上样品研磨啊研磨,孵育啊孵育,然后离心扔掉沉淀(RIPA 不可溶组分),取上清(RIPA 可溶组分)进行下游实验。对对对!都是这么做啊,扔
多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题,我们该如何应对?
这篇综述重点说明使用 RIPA 裂解液提取总蛋白以及下游实验中可能存在的问题。RIPA 裂解液常用于从脊椎动物细胞和组织中提取总蛋白 [1]。但是由于蛋白质间有较大的差异和非蛋白成份的干扰,所以从一个样本中同时释放和溶解所有蛋白质是非常困难的。特别是一些整合到膜上的蛋白质,或与其他蛋白质 / 核酸形成复合物时,就大大阻碍了提取效率。因此可以推断,蛋白质在提取过程中或多或少的与在体内时真实情况不尽相同。经典 RIPA 裂解液中含有低浓度的十二烷基硫酸钠(SDS 变性剂),脱氧胆酸(干扰蛋白质间
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