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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
斯氏梭菌
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
冻干粉
斯氏梭菌说明书培养及打管说明
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
斯氏梭菌说明书菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在上延续使用半年左右。
6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
石蕊牛奶培养基250g用于乳酸菌石蕊牛奶凝固试验
酵母粉葡萄糖録霉素琼脂(YDC) Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 用于食品中霉菌及酵母菌总数测定(ISO标准)
3%録碱性蛋白胨水 Alkaline Peptone Water 250克 副溶血性弧菌的选择性增菌培养
BCYE-Cys琼脂瓶用于军团菌选择性分离incubationmediaBCYE-Cys琼脂瓶用于军团菌选择性分离
MediumⅡ(forTransferringtheTestOrganism)
去氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂 250(g) incubation media 去氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂 250(g)
改良Y培养基 250(g) incubation media 改良Y培养基 250(g)
梭菌增菌培养基 250(g) incubation media 梭菌增菌培养基 250(g)
R2A 琼脂 250(g) incubation media R2A 琼脂 250(g)
0.5%葡萄糖肉汤培养基250g用于环氧消毒和电离辐射消毒过程监测指示菌(枯草杆菌黑色变种芽孢及短小杆菌芽孢)的培养(GB标准)
西蒙氏枸橼酸盐培养基 Simmons Citrate Medium 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)
抗生素5号培养基 Antibiotic Agar NO.5 250克 抗生素微生物的效价测定
mTSB肉汤250用于0性增菌(ISO方法)incubationmediamTSB肉汤250用于0性增菌(ISO方法)
DNaseAgar
人小脑颗粒细胞cDNAHCGC cDNA
CDH1 Others Mouse 小鼠 CDH1 / E-cad / CD324 人细胞裂解液 (阳性对照)
Ana-1 小鼠巨噬细胞
CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞
人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE) 人膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL
人小脑颗粒细胞cDNAHCGC cDNA
CDH1 Others Mouse 小鼠 CDH1 / E-cad / CD324 人细胞裂解液 (阳性对照)
Ana-1 小鼠巨噬细胞
CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞
人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE) 人膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL
斯氏梭菌说明书SIGLEC5 Others Human 人 SIGLEC5 人细胞裂解液 (阳性对照)
食管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
大鼠肾小管上皮细胞完全培养基 100mL
RH-35大鼠肝癌细胞 RH-35 rat hepatoma cells DMEM培养基+10%FBS
IGFBP7 Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)
HA(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2 内皮细胞培养基ECM
斯氏梭菌说明书传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
斯氏梭菌说明书常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。
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文献和实验下厌氧培养 24 h。3. DNA 模板制备及浓度测定 取1.4 ml TPGY 培养物转移到 1.5 ml 离心管中,14000 r/min 离心 2 min,弃去上清液。沉淀使用商品化细菌基因组 DNA 提取试剂盒提取 DNA,按照试剂盒说明书进行操作。提取的 DNA 进行纯度和浓度测定后置于 -20 ℃ 保存。4. PCR 扩增 采用分别针对 A、B、E、F 型肉毒梭菌肉毒毒素基因设计的型特异性引物(见附表1),进行多个 PCR 扩增,每个 PCR 反应管检测一种类型的肉毒梭菌
koseri (= C.diversus) 克氏柠檬酸杆菌(=差异柠檬酸杆菌) Citrobacter koseri/amalonaticus 克氏/无丙二酸柠檬酸杆菌 Citrobacter youngae 杨氏柠檬酸杆菌 Clostridium acetobutylicum 丙酮丁醇梭杆菌 Clostridium barati 巴氏梭菌 Clostridium beijerinckii 拜氏梭菌 Clostridium beijerinckii /butyricum 拜氏/丁酸梭菌
人艰难梭菌毒素 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人粪便及相关液体样本中艰难梭菌毒素 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人艰难梭菌毒素 水平。用纯化的人艰难梭菌毒素 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入艰难梭菌毒素 ,再与 HRP 标记的艰难梭菌毒素 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤
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