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- 2025年07月15日
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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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产品简介：
新霉素(geneticin, G418)又称遗传霉素，是一种氨基糖苷类抗生素, 是常用的细胞稳定转染抗性筛选试剂。G418能阻断蛋白质合成，对细菌、酵母、高等植物以及哺乳动物细胞均具有氨基糖苷类毒性，用于真核细胞从转座子Tn5和Tn601稳定转染新霉素(neo)抗性基因的选择和维持，经常用于基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面。
G418 solution经过滤除菌，一般工作浓度为50～1000ug/ml不等，不同类型的细胞需要根据实验确定佳浓度。在具有相对稳定基因组的细胞(如CHO细胞)中，一旦筛选出稳定细胞株后，无需加入G418即可继续培养。
G418溶液(geneticin,20mg/ml)
注意事项：
尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
加药筛选约5～7天左右，细胞会大量死亡，为了减少死亡细胞对阳性克隆的不利影响以及增加阳性克隆的获得率，可以应用套环法或刮除法结合有限稀释法来筛选阳性克隆。加药后，在高倍镜下，刮除阴性克隆，消化阳性克隆后继续筛选培养。或者用套环套住阳性克隆，在套环内加胰蛋白酶消化，把消化液吸到另外一个新的孔中培养，后再用有限稀释法把阳性克隆在96孔板中筛选。
注意无菌操作，尽量避免污染。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验与所有的化学平衡一样，当溶液的浓度、温度等条件改变时，弱酸、弱碱的解离平衡会发生移动。就浓度的改变来说，除用稀释的方法外，还可在弱酸、弱碱溶液中加入具有相同离子的强电解质以改变某一离子的浓度，从而引起弱酸或弱碱解离平衡的移动。例如，往 HAc 溶液中加入 NaAc ，由于 Ac - 离子浓度增大，使平衡向生成 HAc 的一方移动，结果就降低了 HAc 的解离度。又如，往 NH 3 水溶液中加入 NH 4 Cl ，由于 弱酸溶液中加入该酸的共轭
基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。Ｇ418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。 G418使用方法 室温下运输, 干粉在室温下储存，溶于水、甲醇，溶液于-20℃储存 由于各真核细胞系对G418敏感度不同,各新细胞系或株稳定转染时杀死非稳定转染细胞所需用量需要通过实验优化。最适用量通过建立细胞死亡曲线获得。将细胞稀释至1000cell/ml，每孔100ul加入有培养基的24孔板，将每孔中的G418浓度
潭深水静 请教各位园友： 新买的 anisomycin用什么溶液溶解保存。 谢谢！ 潭深水静 主要用来刺激p-38，有用生理盐水稀释到终浓度的 但不知道用什么来溶解配母液 yhwangcams 根据sigma的说明，可以用多种溶液配制母液： solubility ethanol: 12 mg/mL solubility H2O: 2 mg/mL
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