大肠杆菌TB1感受态细胞

特别提示：包括大肠杆菌TB1感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：大肠杆菌TB1感受态细胞
英文名称：E.coli TB1 Rosetta Competent Cell

产品货号：大肠杆菌TB1感受态细胞
产品规格：10*100μl

 本感受态细胞来源于JM 83，是JM 83 hsdR型，只含有大肠杆菌RNA polymerase，缺少BL21(DE3)菌株的T7 RNA polymerase，适合NEB公司的pMAL 系列质粒原核蛋白表达(The pMAL vectors use the E. coli RNA polymerase)，不能用于pET 系列质粒的表达，具有链霉素抗性。TB1感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。

菌株基因型：F– ara Δ(lac-proAB)rpsL(Strr)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴25分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中并静置2-3分钟，晃动会降低转化效率。
4. 每个离心管中加入700μl 无菌的2YT或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μL左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
6. 将平板倒置于37℃培养箱中培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
4. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

除了大肠杆菌TB1感受态细胞,，我公司还供应以下相关产品：


BTN100103B 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 20次
BTN80909 IPTG溶液 1.5mL
BTN120699 多粘菌素B硫酸盐 5mL
BTN120682 杆菌肽溶液 1mL
BTN120685 先锋霉素溶液 1mL
YT455 STAT3荧光素酶报告基因质粒 1μg
YT465 C端DsRed标签融合蛋白质粒(红色荧光蛋白) 1μg
ALH337 通用载体连接试剂盒 20次
RFT168 T4连接酶 100U
SY0280 多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒 10T
JN0107 pBalbTrx-EK质粒 20次(1μg)
JN0112 pBalbSec质粒 20次(1μg)
QN1047 pUC18载体 20ug
QN1051 氯霉素试剂 10g
QN1057 20×SSC缓冲液，pH5.3 100mL|500mL
MQ0001 DH5α化学感受态细胞 20×100μl/100×100μl
MQ0012 Stbl3化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
MQ0030 DH10B电击感受态细胞 5×50μl/20×50μl
MQ0043 Rosetta(DE3)化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
BTN160686K 零背景TA克隆试剂盒(Kan抗性) 25次