Bestatin

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  • 百奥莱博
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  • 2025年07月11日
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      145

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      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      冷藏

    • 规格

      5mg

    特别提示:包括Bestatin在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:Bestatin
    产品货号:HR8100
    产品规格:5mg



    除了Bestatin,,我公司还供应以下相关产品:



    名称:蛋*磷酸酶抑制剂混合物
    货号:WE0256
    规格:1ml
      组织和细胞在裂解过程中会释放大量内源性蛋*磷酸酶,以各种方式催化磷酸化蛋白去磷酸化。本产品含四种广谱的磷酸酶抑制剂混合物,可有效抑制丝氨酸/苏氨酸磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等。该混合物为100倍浓缩水溶液,可直接加入任何组织类型和细胞的裂解产物中,均能有效抑制磷酸化蛋白质的去磷酸化,从而维护蛋白质的磷酸化状态。适用于Western Blot和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等。

    使用方法
    取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷,按照1:99比例加入Phosphatase Inhibitor Cocktail(例如990μl抽提试剂中加入10μl Phosphatase Inhibitor Cocktail),使其在抽提试剂中成1×工作液。

    储存条件:2~8℃

    名称:40%丙稀酰胺溶液(29:1)
    货号:RFT068
    规格:100ml
    40%丙稀酰胺(29:1)即为含40% acrylamide-bisacrylamide的水溶液,其中acrylamide和bisacrylamide的质量比例为29:1。常用于配制*烯酰胺凝胶(PAGE胶),包括SDS-PAGE胶等,可以用于蛋白的分离。

    储存条件:4℃,避光。

    名称:免疫染色(非荧光)二抗稀释液
    货号:KFS013
    规格:100ml
    免疫染色(非荧光)二抗稀释液可以用于非荧光免疫染色时二抗稀释。经本免疫染色(非荧光)二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2 周内重复使用3-5 次。

    按照每个二抗稀释10 毫升计算,一个包装的免疫染色(非荧光)二抗稀释液可以稀释10 个或10 次二抗。

    本免疫染色(非荧光)二抗稀释液经过滤除菌处理, 使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完,如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。

    对于目标蛋白为核蛋白的免疫荧光实验,建议按0.1%的体积比加入Triton X-100 至免疫染色二抗稀释液中。

    名称:脱氧胆酸钠
    货号:SY0336
    规格:10g
    脱氧胆酸钠(Sodium deoxycholate)是一种水溶性,胆酸类的阴离子去垢剂,能够有效破坏许多蛋白间的相互作用,普遍用于蛋白相关的实验。常用作细胞裂解液(如RIPA)的组分之一。用于脂质体制备,膜蛋白和脂质化合物提取,细胞核分离,代替脑磷脂做胆固醇絮状试验以及亲和层析中用来洗脱或再生柱子。还是一种细胞培养基添加剂。另外,它可以增加脂肪的溶解,以促进其在肠中的吸收。

    中文别名:去氧胆酸钠;3α,12α-二羟-5β-胆烷酸钠盐;
    英文别名:Sodium deoxycholic acid; deoxycholic acid, sodium salt;
    CAS:302-95-4
    分子式:C24H39O4Na
    分子量:414.56
    外观:白色结晶粉末
    纯度:≥99%
    胆酸钠:≤2%
    溶解性:溶于水(330 g/L at 15℃)
    储存条件:室温
    结构式:
    Bestatin

    名称:磷酸化蛋白富集试剂盒
    货号:HR0015
    规格:50T/100T
    磷酸化蛋白富集试剂盒是利用磷酸基团与金属的亲和力,采用固定化金属螯合层析(IMAC)的方法富集磷酸化蛋白。可以选择性的对磷酸化蛋白和多肽进行富集和纯化。本试剂盒可以用来提取富集哺乳动物细胞、组织、细菌、酵母、植物等样本的的磷酸化蛋白。
    经本试剂盒制备的蛋白样品可用于Western blotting,mass spectrometry,2D-PAGE和protein arrays等下游应用。

    储存条件:蛋白酶磷酸酶抑制剂-20℃保存;其它2-8℃保存。蛋白柱室温避光保存。
    有效期:一年。

    注意事项:
    ●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
    ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
    ● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
    ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
    ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

    试剂盒以外自备试剂和仪器:
    ● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
    ● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒

    使用方法:

    使用注意事项:
    1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
    2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
    3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
    4.蛋白样品中不可含 EDTA。
    5.上样蛋白样品 pH 值必须低于6,蛋白浓度在0.25-0.5mg/ml。
    6.洗涤细胞和组织是不能用 PBS等磷酸盐缓冲液,要用非磷酸盐缓冲液,如50mM HEPES,Tris等或生理盐水。
    7.可以根据自己实验需要加入其它磷酸酶抑制剂单品。
    8.用蛋白柱进行磷酸化蛋白富集,需要离心操作时将蛋白柱置于一个 50ml离心管离心即可。
    9.最终蛋白样品用于 2D电泳前需脱盐。
    一、蛋白样品的准备:
    以下为由细胞和组织制备蛋白样品的参考步骤,其它方法得到的蛋白样品稀释至蛋白浓度为0.25-0.5mg/ml 后直接上样即可,确保蛋白样品的pH 值低于6。
    可以用试剂盒中的洗柱液、裂解液、洗涤液稀释蛋白样品。
    细胞裂解:
    1.提取液制备:每 500μl冷的裂解液中加入2μl蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
    2.取5-10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
    3.用冷生理盐水洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
    4.每 5×106个细胞中加入500μl冷的蛋白裂解液,混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
    5.在 4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
    6.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白裂解液。
    组织裂解:
    1.提取液制备:每 500μl冷的裂解液中加入2μl蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
    2.取100mg组织样本剪碎,加入总蛋白提取液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
    3.将组织匀浆吸入一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
    4.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白裂解液。
    植物蛋白提取:
    1.裂解液制备:每500μl冷的提取液中加入2μl蛋白酶磷酸酶抑制剂,混匀后置冰上备用。
    2.取200mg植物组织样本,去除粗筋脉络等后剪碎,置于研钵中用液氮研磨。(没有液氮也可直接置冰上研磨即可)
    3.研磨后加入 500μl提取液,混匀后于一个预冷的干净离心管中在冰上静置2-3小时。
    4.在 4℃,12000rpm以上条件下离心10-15分钟。
    5.将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到总蛋白。
    细菌蛋白提取:
    注:细菌中磷酸化蛋白量较少,请根据样本情况调整所需的样本量。经过基因工程改造的可以直接合成表达磷酸化蛋白的细菌样本,根据情况处理细胞,不一定按下面的步骤。

    1.裂解液制备:每500μl冷的提取液中加入2μl蛋白酶磷酸酶抑制剂,混匀后置冰上备用。
    2.在 4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5min,弃上清,尽量吸干剩余液体,收集菌体,用生理盐水洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
    3.按每 20mg湿重菌体样本加入500μl裂解液,吹打混匀,冰上放置20-30分钟。
    4.300w,10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。
    5.在 4℃ 12000RPM条件下将菌液离心5分钟,将上清移入冷的干净离心管。
    6.即得到细菌总蛋白样品。
    二、柱平衡:
    加入 500μl 洗柱液洗柱,重力作用下或4℃下1000g 力离心1分钟甩干吸附柱。
    三、上样:
    将以上蛋白裂解液或其它待富集蛋白样品加入吸附柱,重力作用下或4℃下1000g力离心1分钟甩干吸附柱。
    四、洗柱:
    加入300μl洗涤液洗柱,重力作用下或4℃下1000g力离心1分钟甩干吸附柱。重复两次。
    五、洗脱:
    加入500μl磷酸化蛋白洗脱液,重力作用下或4℃下1000g力离心1分钟甩干吸附柱,收集洗脱液,即得到磷酸化蛋白。
    六、柱保存和柱再生:
    磷酸化蛋白纯化柱如果保存和处理得当的话可以多次重复使用。
    使用后可以用1ml 0.1M EDTA溶液洗柱,然后在柱中加入20%乙醇溶液密封,置2-8℃保存。
    加入0.1M*化铁溶液,浸泡蛋白柱填料,即可对蛋白柱进行再生。

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