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- 百奥莱博
- YT470-SYF
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
138
- 英文名：
C-HA plasmid（with CMV promoter）
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1μg
特别提示：包括C端HA标签融合蛋白质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：C端HA标签融合蛋白质粒
英文名称：C-HA plasmid（with CMV promoter）
产品货号：YT470
产品规格：1μg
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端与HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的3"端含有一个可以编码HA标签的序列，因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白，可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-740 |
| c-HA tag | 741-767 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 820-841 |
| SV40 polyA signal | 853-1236 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1374-1678 |
| bla promoter | 1703-1827 |
| SV40 promoter | 1847-2185 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2220-3011 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3012-3470 |
| pUC origin | 3599-4266 |
本质粒(5010bp)的图谱如下：
使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件：-20℃。
除了C端HA标签融合蛋白质粒,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN130805 | 单细胞悬浮液 | 1mL |
| BTN80806 | 大肠杆菌TOP10化学感受态细胞 | 0.1mL*10 |
| BTN80910 | X-gal溶液 | 10mL |
| YT469 | C端Flag标签融合蛋白质粒 | 1μg |
| YT470 | C端HA标签融合蛋白质粒 | 1μg |
| SY0013 | XL10化学感受态细胞 | 100μl×10管 |
| MQ0002 | TOP10化学感受态细胞 | 20×100μl/100×100μl |
| MQ0041 | BL21-Star(DE3)pLysS化学感受态细胞 | 10×100μl/50×100μl |
| MQ0063 | Y1HGold酵母感受态细胞 | 10×100μl/50×100μl |
| GL2121 | PolyLea非脂质体转染试剂 | 0.5ml|1ml|5×1ml |
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文献和实验）时。这有助于研究低丰度蛋白质和优化难以表达的蛋白质项目。它也是一个很好的纯化标签。FLAG 序列还含有肠激酶切割位点，如果标签位于 N 端，切除后不留多余的残基。谷胱甘肽 S - 转移酶（GST）GST 是最早被使用的表位标签之一；它可以置于 N 或 C 端并可以蛋白质的可溶表达。用谷胱甘肽结合树脂进行纯化。绿色荧光蛋白（GFP）在表位标签中独一无二，GFP 是一种自发荧光的 27 kDa 标签，可通过荧光显微镜直接在活细胞中检测到。血凝素 A（HA）HA 来自流感血凝素蛋白的结合结构域，含有高
处理过的融合蛋白的2倍以上，这也说明标签的存在降低了该酶的活性。可以用固化了Cu2+的亲和层析柱去除切除的融合标签。 ■ 八种人趋化因子（Magis-trelli 2005）——所有的蛋白都在OrigamiTM B菌株中表达提高它们在胞质中的二硫键形成率。在趋化因子编码序列的C端引入了AviTMTag（亲和素）生物素化序列。切割后的细胞趋化因子可以用单体的亲和素树脂亲和层析与切割下的NusA标签和蛋白酶混合物分离开。所有切割纯化后的蛋白在细胞趋化实验中都显示了活性，而没有一个融合蛋白有这样的活性
一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性带His标签（N端）+TrxA(硫氧还蛋白)：PET-32
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