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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
54
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃或-80℃
- 规格:
5次
一步法大提质粒 DNAout5次说明书特点:
RNALOCKER 是一种在较高温度下保存 RNA 样品的非冻型无毒溶液,它能 迅速渗入细胞内,通过高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。
1. 操作简单,将组织剪薄浸没在 RNALOCKER 中即可使其 RNA 不被降解。
2. 替代液氮,使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其适用于临床和 野外样品的快速和大规模采集。
3. RNA 完整,因 RNALOCKER 能迅速抑制组织中 RNA 酶的活性,故从中提取 的 RNA 的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4. 方便运输,处理过的样品能在 25℃保存一周,使样品邮寄和运输变得容易 和便宜,有利学术合作和交流。
5. 反复冻融,经 RNALOCKER 处理的样品可反复冻融 20 次,其间可对样品进 行各种处理而不影响zui终提取的 RNA 的质量。
6. 结果准确,RNALOCKER 进入细胞十分快速,基因表达在发生应急改变前就 得以锁定,故 RNA 分析更能反映取样时的真况。
7. 可比性强,RNALOCKER 能减少大规模样品处理中的误差,增加各次实验数 据间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8. 兼容性广,虽然处理过的样品可以使用天泽基因的动物 RNAOUT 和 TRIzol 等试剂提取其 RNA,样品还可直接用于组织切片,免疫学和流式细胞分析而 不影响 RNA 提取的质量。
一步法大提质粒 DNAout5次说明书实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(——=25:24:1),作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
C1GALT1 N-乙酰半糖胺糖蛋白3、β-半糖转移酶1抗体规格: 0.2ml
Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗体规格: 0.1ml
phospho-APE(Ser1417) 磷酸化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体规格: 0.1mlDC-SIGN/CD209 细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体规格: 0.1ml
FAM46D/CT112 瘤/睾抗原112抗体规格: 0.2mlGPS1/CSN1 G蛋白通路抑制蛋白1抗体规格: 0.2ml
IRX5 Iroquois同源蛋白5抗体规格: 0.2ml
CD25/IL-2RA 白介素2受体a链抗体 IL-2Ra规格: 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗羊IgG规格: 0.1ml
UBE2E2 泛素蛋白连接酶2E2抗体规格: 0.2mlRabbit Anti-human sIgA/Cy3 Cy3标记的兔抗人分泌型IgA规格: 0.1ml
CCDC22 卷曲螺旋结构域蛋白22抗体规格: 0.2ml
Cytokeratin 5/CK5 细胞角蛋白5抗体 0.1mlFLAP/5-lipoxygenase activating protein 5脂氧合酶激活蛋白抗体规格: 0.2ml
PTPH1/PTPN3 蛋白酪氨酸磷酸酶H1抗体规格: 0.2mlUCP-1 线粒体脱偶连蛋白1抗体规格: 0.1ml
一步法大提质粒 DNAout5次说明书喹禾灵(分析标准品,96%) CAS: 76578-14-8 英文名称 Quizalofop-ethyl 质量规格:分析标准品,96%
精喹禾灵(分析标准品,98%) CAS: 100646-51-3 英文名称 Quizalofop-p-ethyl 质量规格:分析标准品,98%
二甲戊乐灵(分析标准品,99%) CAS: 40487-42-1 英文名称 Pendimethaline 质量规格:分析标准品,99%
氯菊酯(标准品) CAS: 52645-53-1 英文名称 Permethrin (isomers) solution 质量规格:分析标准品
残杀威标准溶液(100μg/ml,u=2%) CAS: 114-26-1 英文名称 Propoxur solution 质量规格:100μg/ml,u=2%
草甘膦(分析标准品,99.5%) CAS: 1071-83-6 英文名称 N-(Phosphonomethyl)glycine 质量规格:分析标准品,99.5%
草甘膦标准溶液(100μg/ml,u=2%) CAS: 1071-83-6 英文名称 N-(Phosphonomethyl)glycine solution 质量规格:100μg/ml,u=2%
草甘膦标准溶液(10μg/ml,u=2%) CAS: 1071-83-6 英文名称 N-(Phosphonomethyl)glycine solution 质量规格:10μg/ml,u=2%
辛硫磷(分析标准品,99%) CAS: 14816-18-3 英文名称 Phoxim 质量规格:分析标准品,99%
除草醚标准溶液(10μg/ml,u=5%) CAS: 1836-75-5 英文名称 Nitrofen solution 质量规格:10μg/ml,u=5%
2-萘氧乙酸(标准品) CAS: 120-23-0 英文名称 2-Naphthoxyacetic acid 质量规格:分析标准品
一步法大提质粒 DNAout5次说明书注意事项:
1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
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文献和实验一步法提取质粒DNA主要用于鉴定阳性克隆。 主要步骤如下: 收集1.5mL菌体,彻底除去培养基; 加入50ulSTE缓冲液重悬菌体; 加入50ul酚:氯仿;异戊醇(25:24:1),混匀; 12000rpm离心5分钟,取上清到另一离心管中; 加入NH4Ac至终浓度2M,并加入2倍体积的乙醇,混匀,室温或冰上放置几分钟; 12000rpm离心5分钟,弃上清,75%乙醇清沉淀; 沉淀干后,以水或TE缓冲液溶解,便
分析、蛋白质的体外翻译等均依赖于高纯度完整的RNA。 因此, 如何获得高质量的RNA是研究人员关注的问题。1987年Chomczynski等 [1] 建立了酸-异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法(acid-guanidine-phenol-chloroform, AGPC)。该方法较以往的传统方法操作简单,无需特殊的设备,抽提时间缩短至4 h,因而得到广泛的应用。数家公司据此开发出RNA提取试剂盒 [2,3] 。使用试剂盒简单方便,但价格相对昂贵。为探索操作简便、经济实用、快速
1.材料和方法Access RT-PCR System 试剂盒 (A1250):Promega 公司产品。500u AMV Rev 目的基因 se Transcriptase, 5u/ul500u Tfl DNA Polym 目的基因 ase, 5u/ul1 ml AMV/Tfl 5×Reaction Buff 目的基因1.25 ml MgSO4, 25 mM100ul dNTP Mixture, 10 mM each of dATP, dCTP, dGTP and dTTP50
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