多聚-L-赖氨酸(15-30万)

特别提示：包括多聚-L-赖氨酸(15-30万)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：多聚-L-赖氨酸(15-30万)
英文名称：Poly-L-Lysine
ＣＡＳ＃：25988-63-0
产品货号：QN1264
产品规格：25mg

本品可用于促进细胞粘附到固体基质。

CAS号：25988-63-0
分子量：150,000～300,000
储存条件：2～8℃，有效期24个月。

聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要，细胞表面的糖蛋白(阴性)易于吸附在亲水性的表面上，因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附，这正是运用多聚赖氨酸优化细胞培养表面的重要所在。

应用：
适用组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等使用的玻片的防脱片处理，以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养，增加细胞贴壁能力。

溶液配制：用去离子水溶解，配制成母液备用。保存于-20℃。

玻片处理：
1. 灭菌水稀释聚赖氨酸溶液，一般的使用浓度为0.01％。
2. 将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。
3. 在60℃烘箱1小时干燥，或室温18-26℃过夜干燥待用。
注意：
1. 每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液要包被的玻片40-90张， 超过90张片子将影响其黏合力。
2. 用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3. 释过的多聚赖氨酸溶液要放在2～8℃，至少在3个月内是稳定的。
4. 用过的稀释液要过滤，若出现浑浊或长菌要丢弃
5. 多聚赖氨酸浓度可以高一些，吸出来的可以重复利用至少20次。

培养瓶处理：
1. 包被培养板或者是培养瓶，一般多聚赖氨酸浓度为0.01％，
2. 准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
3. 0.01%的多聚赖氨酸以50微升每平方厘米的量均匀涂于培养底物的表面，室温下静置5min，吸除多余液体。
4. 加入灭菌水，反复冲洗三次，无菌操作。
5. 处理后无菌晾干备用。
6. 回收后保持无菌的多聚赖氨酸可反复利用。

除了多聚-L-赖氨酸(15-30万),，我公司还供应以下相关产品：



名称：Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
货号：WE0279
规格：50次
  常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白，对于相对分子量小的，尤其是10 kD以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽，成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。本产品包括Tricine-SDS-PAGE凝胶制备所需全套试剂，只需自备蒸馏水，即可制备高质量各种浓度的凝胶，方便、快捷，电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。

试剂盒组成：

组份	50次
49.5%T 3%C	30ml
49.5%T 6%C	100ml
Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer	140ml
Glycerol	30ml
APS	0.5 g
TEMED	750μl

本产品所提供的APS(过硫酸*(代"铵"))为固体粉末，使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水)，将溶液分装后置于-20℃保存，通常半年内有效。溶液在使用中可放置4℃保存两周。

注意事项：
1、本产品所提供的APS(过硫酸*(代"铵"))为固体粉末，使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水)，10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定，应尽量减少室温存放时间，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换，使用-20℃保存的10%APS。
2、在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
3、在分离胶上层加纯水时要小心操作，加水时速度不能太快。
4、丙*酰胺具有神经毒性，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
5、本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：

根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，凝胶浓度配方参考附表。

I 配制分离胶
1、将不同体积的纯水、49.5%T 6%C、Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer和Glycerol(甘油)加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液(对于1 mm mini-gel，分离胶溶液加约4ml)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

II 配制夹层胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水尽量吸去。
1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3、将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面(对于1 mm的mini-gel，夹层胶溶液加约1ml)， 然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层，使凝胶表面保持平整。
4、静置，待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

附表Tricine-SDS-PAGE凝胶配方表：

组份	分离胶(胶浓度/配制体积)			夹层胶 (胶浓度/配制体积)	浓缩胶 (胶浓度/配制体积)
	20%/4.5ml	16.5%/4.5ml	15.5%/4.5ml	10%/2ml	4%/2ml
49.5%T 3%C	-	-	-	0.407ml	0.16ml
49.5%T 6%C	1.82ml	1.5ml	1.395ml	-	-
凝胶缓冲液	1.5ml	1.5ml	1.5ml	0.667ml	0.496ml
甘油	0.48ml	0.48ml	0.48ml	-	-
ddH2O	0.7ml	1.02ml	1.125ml	0.926ml	1.344ml
10% AP	40μl	40μl	40μl	20μl	20μl
TEMED	5μl	5μl	5μl	3μl	3μl

III 配制浓缩胶
去除覆盖在夹层胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
5、进行电泳操作。

IV 电泳
将电泳槽放入4℃或冰水浴中，外槽加入阳极缓冲液，内槽加入阴极缓冲液，30V预电泳10 min，将样品(已经过Tricine专用上样缓冲液处理)加入点样孔后30V电泳1小时，100V电泳至溴酚蓝到达胶底部后停止电泳，进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。

储存条件：2～8℃