溶酶体染色试剂盒(绿色荧光)-L01

特别提示：包括溶酶体染色试剂盒(绿色荧光)-L01在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：溶酶体染色试剂盒(绿色荧光)-L01
产品货号：HR0599
产品规格：250T/500T

L01溶酶体染色试剂盒是利用L 系列探针进行溶酶体特异性染色的试剂盒。
本试剂盒中L01溶酶体染色探针为绿色荧光标记的溶酶体探针，具有504/511nm的最大激发/发射波长。
L系列探针是对活细胞中的溶酶体进行选择性染色的一类荧光染料，该系列探针可以选择性标记溶酶体，只需要纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞。
L系列探针可自由穿过细胞膜，适用于观察溶酶体内部生物合成及相关发病机理。
L系列溶酶体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针，我公司还可以提供红色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。

储存条件：染料-20℃避光保存；稀释液2-8℃保存。
有效期：六个月。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 使用前请仔细阅读产品说明书。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● HBSS ●离心机 ●荧光显微镜/激光共聚焦显微镜

使用方法：

使用注意事项：
● L01染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
●染色后立即进行分析。

1．染色工作液配制：
根据样本数量，用染料稀释液将L01荧光染料100倍稀释，再用相应的培养基或者HBSS缓冲液150-200倍稀释，配制成染色工作液。
【注】:
① 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，-20℃避光冻存，一年稳定。开始实验前，使用培养基或HBSS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。工作浓度为根据不同细胞的预实验结果确定的最佳工作浓度，一般染色终浓度15000-20000倍稀释。
② 工作液现配现用。
③ 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
④ 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，荧光信号会衰减
2．细胞染色
2.1对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30分钟～2小时(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2对于悬浮细胞
1)离心，吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30分钟～2小时(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。
【注】:
对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
3．观察结果：
在荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。最大激发/发射波长为504/511nm。

除了溶酶体染色试剂盒(绿色荧光)-L01,，我公司还供应以下相关产品：



名称：神经元示踪剂—荧光金
货号：KFS136
规格：1mg

名称：—硫代黄素T(ThT) 碱性黄(β-淀粉样蛋白染料)
货号：KFS139
规格：100mg

名称：Hoechst 33342/PI双染试剂盒
货号：KFS253
规格：100T
荧光染料Hoechst33342 能少许进入正常细胞膜，使其染上低蓝色，而凋亡细胞的膜通透性增强，因此进入凋亡细胞中的Hoechst33342 比正常细胞的多，荧光强度要比正常细胞中要高，此外，凋亡细胞的染色体DNA 的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA 结合，并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将Hoechst33342 排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。而PI 染料是不能进入细胞膜完整的正常细胞和凋亡细胞中，即活细胞对PI 染料拒染，而坏死细胞由于膜完整性在早期即已破损，可被PI 染料染色。

用Hoechst33342 结合PI 染料对凋亡细胞进行双染色，就可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在双变量流式细胞仪的散点图上，这三群细胞表现分别为：正常细胞为低蓝色/低红色（Hoechst33342+/PI+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（Hoechst33342++/PI+），坏死细胞为低蓝色/高红色（Hoechst33342+/PI++）

注意事项
1. 在红色荧光对兰色荧光散点图上，还可见到细胞凋亡区向细胞坏死区迁移的轨迹，可能是凋亡细胞的DNA 进一步降解的缘故。
2. 用Hoechst33342 染料与细胞孵育的时间不宜过长，一般控制在20min 之内为宜。如果太长可引起Hoechst33342 的发射光谱由蓝光向红光的迁移，导致红色荧光与兰色荧光的比例改变，从而影响结果的判断。
3. Propidium Iodide（PI）有毒，操作时要戴手套。

储存：2-8℃，避光，有效期一年。

名称：伊红染色液(进口水溶,5%)
货号：GL2617
规格：100ml
用途：
又称曙红染色液，常规切片HE染色

注意事项：
主要由伊红、双蒸水、防腐剂等组成。

储存条件：室温，12个月

名称：伊红染色液(水溶,0.5%)
货号：GL2624
规格：100ml|500ml
用途：
又称曙红染色液，常规切片HE染色

注意事项：
主要由伊红、防腐剂等组成。

储存条件：室温，12个月

名称：氨*溶液(0.5%)
货号：GL0690
规格：500ml
用途：
促蓝夜

注意事项：
苏木素在酸性环境中脱色后，在碱性环境中显色。

储存条件：室温，12个月

名称：conn改良Weigert革兰染色液
货号：GL0833
规格：4×50ml
用途：
改良的细菌革兰染色，可以区分Gram阳性细菌和阴性细菌，尤其适用于鉴别细菌和非细菌的蓝色微颗粒状物质(如钙盐)。

注意事项：
革兰阳性菌和纤维素呈蓝紫色，阴性菌呈红色。

储存条件：室温，避光，12个月

名称：番红O乙醇溶液(1%)
货号：GL0876
规格：100ml
用途：
细胞核、染色体和植物木质部等染色

注意事项：
属于碱性染料，能溶于水和酒精。

储存条件：室温，12个月

名称：环保透明剂
货号：GL2755
规格：500ml|20×500ml
用途：
供组织病理学实验室和细胞学实验室用于取代二甲*进行浸蜡组织样本处理及脱蜡、透明，细胞学制片的透明

注意事项：
主要组成成份：烷烃化合物，不含二甲*

储存条件：室温，24个月