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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
452
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
2×50ml
特别提示:包括天青A-伊红染色液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:天青A-伊红染色液
产品货号:GL2668
产品规格:2×50ml
用途:
浆细胞核深蓝色,胞质灰蓝色。
储存条件:室温,避光,6个月
除了天青A-伊红染色液,,我公司还供应以下相关产品:
名称:油红染色试剂盒
货号:KFS112
规格:100T
油红属于偶氮染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,与甘油三酯结合呈小脂滴状。
脂溶性染料能溶于组织和细胞中的脂类,它在脂类中的溶解度比在溶剂中大。当组织切片置人染液时,染料则离开染液而溶于组织内的脂质(如脂滴)中,使组织内的脂滴呈橘红色。
操作步骤:
1. 先小心倒掉培养基,用PBS 漂洗1 次
2. 加10%中性甲醛固定30 分钟;
3. PBS 漂洗2 次
4. 孵育液孵育5 分钟。
5. 60℃温箱内,油红染液染色10min。
6. 用脱色液A 漂洗2 次。
7. 用脱色液B 漂洗2 次。
8. 苏木素复染20-60s。
9. 用脱色液B 漂洗2 次。
10. 封片保存。
11. 显微镜观察,组织细胞中脂滴呈橘红色,核呈蓝色。
储存:2~8℃,有效期一年。
名称:细胞内氯离子染色试剂盒
货号:HR0623
规格:500T
名称:细胞膜染色试剂盒(橙色荧光)-M03
货号:HR8434
规格:1000T/5000T
细胞膜染色试剂盒是用一种亲脂性的橙色荧光探针进行细胞膜染色。染色液I 进入细胞膜后,在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液I在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出橙色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。
染色液I 通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
储存条件:4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期:六个月。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS ●培养基 ● 移液器及吸头 ●荧光显微镜/流式细胞仪
使用方法:
使用注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●染色后立即进行分析。
●染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
●本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
A:染色工作液的配制:
根据样品数用纯水将试剂B进行10倍稀释,放入37℃培养箱预热。用稀释后的试剂B将染色液I 进行200-1000倍稀释,配制成染色工作液。
【注】工作液最佳最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系做预实验来优化。
B:悬浮细胞染色
1.用PBS 洗涤细胞2次。
2.加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1×106/mL。
3.37 ℃孵育细胞 5~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4.孵育结束,500 Xg离心5min。
5.倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的培养液重悬细胞。
6.重复(4),(5)步骤两次以上
C:贴壁细胞染色
1.用PBS 洗涤细胞2次。
2.细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3.37 ℃孵育细胞 5~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min 作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记结果。
4.吸干染色工作液,用培养液洗培养板或盖玻片2~3次,每次用预热的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸干培养基。
D:用荧光显微镜或流式细胞仪检测
最大激发波长为555nm,最大发射波长为570nm。
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文献和实验分光光度计上测定A505,以0号管作空白对照。以肝素钠效价为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。 (二)样品测定 精确称取10~15g 待测样品,先用少量 蒸馏 水使其完全溶解,再加水使成1mg/mL 溶液。取2.5mL, 蒸馏 水稀释到250mL,混均,使成1mg/100mL 的测定液。吸取0.2~1.2mL 测定液,加水补足至2mL,依次加入巴比妥缓冲液2mL,天青A 溶液0.5mL,摇匀于722 分光光度计 上测定
(1) 甲醛液中固定时间过长. (2) 切片过厚. (3) 组织固定不佳. (4) 苏木精和伊红染色分化不良. 2.处理方法 (1) 固定液甲醛易氧化成甲酸,使细胞核在酸性液体的作用下不易着色,而细胞浆酸性增加后伊红染色加深,所以在备用的甲醛溶液中加入少量的碳酸镁或碳酸钠来做中和剂,以防止染色不良 (2) 切片厚度控制在3~5&mu
20ml醋酸,室温保存,用前过滤。 (2)伊红染色液:取蒸馏水 75ml,先将少许蒸馏水加入0.5~1.0g伊红,用碾棒将伊红碾碎,再加入全部蒸馏水,溶解后加入95%乙醇25ml,最后滴入醋酸1~2滴。 (3)盐酸乙醇分化液:盐酸0.5ml,75%乙醇100ml。 (4)二甲苯,100%乙醇,95%乙醇,80%乙醇,75%乙醇,蒸馏水。 (5)甲醇,苦味酸,中性树胶。 (6)组织切片机,离心机,光学显微镜,离心涂片机。 【操作方法】 1、石蜡切片的HE染色 取一组
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