无菌脱纤维裂解山羊血

小鼠脾脏单细胞悬液制备流程及注意事项

。 加入2 mL 1×红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解2~3 min后，立马加入10 mL PBS，300 g离心5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬脾脏细胞，将细胞悬液用200目筛网再次过滤后计数, 并调整细胞浓度至1×107/mL。 b) 吹打法 小鼠颈椎脱臼处死，置于75%乙醇浸泡5 min后，取出小鼠，置于无菌操作台上，左腹侧朝上。 小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏。 脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露出脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面

小鼠骨髓单细胞悬液制备流程及注意事项

），剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意在该过程中应保留尽可能多的骨髓腔。 拿一支1 mL的无菌注射器，吸取1 mL PBS，轻轻插入骨髓腔，冲洗骨髓腔以获得骨髓。重复2~3次，可冲出绝大部分细胞。冲洗完后，用移液器轻轻吹打细胞，将细胞团吹散。 将冲洗液用200目的滤网过滤，滤液收集于15 mL离心管中，300 g离心5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞，细胞计数，并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意事项： 骨髓样本细胞分群明显，可以裂解红细胞，也可不裂解。如需裂解红细胞，可以加入

溶血试验的原理及注意事项

：1. 链球菌溶血试验：用羊血悬液，37 摄氏度下培养较短时间即可观察到溶血现象。2. 白喉杆菌：用含兔血成分的培养，需隔夜培养。3. 弧菌溶血试验：用无菌脱纤维山羊血培养基，37 摄氏度下培养 1 天，全部或大部分红血球被溶解方可判定为阳性。本文章内容版权归海博生物所有，未经授权不得转载。