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- 百奥莱博
- RFT118-FTE
- 北京
- 2025年07月15日
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225
- 英文名：
Lambda bacteriophage DNA
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
100μg
特别提示：包括λ噬菌体DNA在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：λ噬菌体DNA
英文名称：Lambda bacteriophage DNA
产品货号：RFT118
产品规格：100μg
本品常用于限制性内切酶的底物。
长度：48502bp
纯度：A260/A280=1.8～2.0
浓度：0.4μg/μl
分子量：31.5×10^6Da
贮存溶液：10mM Tris-HCl pH8.0，1 mM EDTA
来源：Bacteriophage λcⅠ857 Sam7
储存条件：-20℃。
除了λ噬菌体DNA,，我公司还供应以下相关产品：
名称：大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞
货号：BTN90505
规格：0.1mL*10
本产品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达107。BL21(DE3)菌株适合表达非毒性蛋白。
该感受态细胞用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3 区的lacUV5启动子，该区域整合于BL21的染色体上。
菌株基因型为：F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)
储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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文献和实验λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径，其一是裂解生长，环状DNA分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次感染；其二是溶源性生长，即感染细胞内λ噬菌体DNA整合到宿主菌染色体DNA中与之一起复制，并遗传给子代细胞，宿主细胞不裂解。平板培养时，裂解生长形成噬斑。液体培养时，裂解生长使菌液中宿主菌最后全部被裂解而释放出大量的噬菌体颗粒。经过改造的λ噬菌体克隆位点可插入几到几十kb
) may be useful to monitor cell growth. Our experience suggests if the bacterial cultures clear too soon, DNA yields may be reduced. This problem can be overcome by using a more dilute phage stock. 4. After the cultures clear, add 100μl chloroform and continue
本文叙述了用甲酰胺和SDS/蛋白酶K从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA以及可被单一限制酶或双限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备方法。因为在某些情况下，制备好的λ噬菌体DNA还必须经单一限制酶或双限制酶切割作用才可用于克隆。详情请查看下列pdf文件：“λ噬菌体DNA的制备” （如果你无法在线阅读pdf文件，敬请下载安装adobe reader，官方下载，天空下载） λ噬菌体DNA的制备 本资料来源于网络，如有异议请联系我们，我们将在3个工作日内作出处理。
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