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- 上海烜雅
- XY-MY-0080
- 上海
- 2025年10月20日
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100
- 英文名：
Sodium Citrate Antigen Retrieval Solution,100X
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上海烜雅生物科技有限公司
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20
| 英文名称： | Sodium Citrate Antigen Retrieval Solution,100X |
| 中文名称： | 100X柠檬酸钠抗原修复试剂 |
| 保存条件： | Store at 2-8℃ |
| 产品介绍： | 简介 细胞或组织用、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率，降低背景染色，提高检测的准确性。 柠檬酸钠抗原修复液(Citrate Antigen Retrieval solution)是一种常用的抗原修复液，可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果，亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时，考虑进行抗原修复。 本产品为100X浓缩液，使用前请用蒸馏水稀释成1X工作液。 抗原修复方法： 方法1：沸水浴修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境，保持外部沸腾状态15min，自然冷却至室温。 方法2：微波修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中，高火5min，停火3min，中火5min，自然冷却至室温。 方法3：高压修复，将盛有修复液和玻片的烧杯置于高压锅，上汽后修复2-5min，然后将高压锅置入凉水中，减压至正常后取出玻片。 注意事项： 1. 本产品溶解后为高倍浓缩液，环境温度较低时可能会有结晶析出，可加热助溶，待溶解完全后再行稀释使用。 2. 脱蜡水化的切片，应避免因切片干燥，而至非特异性染色。 3. 热修复操作时务必谨慎，当心烫伤。 4. 热修复时间过长易导致脱片，请注意控制时间。 |
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文献和实验不完全，若存在，需延长脱蜡时间或换用新的二甲苯。 （5）抗原修复不完全：对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合。 （6）细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应：可加入组织透化步骤，进行细胞膜或核膜的透化。 （7）试剂盒保存不当：请于 4℃ 进行保存，勿室温防止过长时间。 （8）封闭时间过长：若使用封闭液进行封闭，请排除封闭液对抗原抗体结合的影响。 Q2：免疫组化染色弱怎么办？ （1）抗体浓度过低，孵育时间过短：可提高抗体浓度，进行抗体4℃过夜孵育。 （2）组织
染色通常需要样品制备、抗原修复、封闭、目的抗原检测等操作。IHC 实验成功的关键在于稳定、优化且可重复的染色方案。下图为 IHC 的实验操作步骤。 图 4 IHC操作步骤 免疫组化样本固定多使用甲醛进行固定，通过形成亚甲基桥而将蛋白交联起来，掩盖掉抗原位点，从而影响抗原-抗体的结合。抗原修复则会破坏这些亚甲基桥，暴露出抗原位点，使抗体能够与之结合。用于抗原修复的两种方法分别为热诱导表位修复法和酶修复法。 表 3 抗原修复方式分类 图 5 免疫组化实验检测 Phospho-Akt 表达 注
一、SP 法 1）脱蜡、水化；2）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；3）3% H2O2（80% 甲醇）滴加在 TMA 上，室温静置 10 分钟；4）PBS 洗 2～3 次各 5 分钟；5）抗原修复；6）PBS 洗 2～3 次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温 20 分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗 50μl，室温静置 1 小时或者4℃过夜或者37℃1小时。9）4℃ 过夜后需在37℃复温45分钟。10）PBS 洗 3 次各 5 分钟；11）滴加 Ⅱ 抗 40～50 μl，室温
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