- ￥2800
- 中科院
- 中国
- YS14004C
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 细胞类型：
I类
- 品系：
优良品
- 组织来源：
中科院
- 物种来源：
中科院
- 细胞形态：
贴壁
- 器官来源：
中科院
- 运输方式：
常温运输或冻存干冰运输
- 年限：
3~5代
- 生长状态：
优良
- 规格：
5×106cells/T25细胞培养瓶
A549-5FU细胞扩增培养
1. 常规复苏，以MCcoy5A培养基+10%胎牛血清培养。
2.待细胞生长状态良好时(24-72h)，更换含2.5x10-5mg/ml5-FU（5-氟尿嘧啶）（临床注射液稀释后使用）的培养液。
3. 用含药培养液连续培养2周。根据细胞密度，需要传代时，传代处理。
4. 更换不含药培养液，培养2周。根据细胞密度，需要传代时，传代处理。
5. 扩增到足够数量，不含药培养周期中，常规方法冻存。
说明：在最高耐药浓度下，细胞增殖很慢。
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文献和实验我也在养A549细胞，也来讲讲自己的经验，希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度，大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了，时间长短不一，大概有5-7天吧，一瓶一般传3-4瓶，中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基，然后用PBS洗一两次，然后再用0.25%胰酶消化（100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右），可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆，缝隙变大（我的细胞大概要2min左右），即可倒去消化液，加入培养基，吹打
导致无法捕获时间序列的变化，导致重要发现被忽略。 由于这些局限性，我们认为，直接和时间评估细胞增殖/细胞毒性的方法的发展对于使用培养细胞的研究领域是重要的。 试验大纲 为了验证 Evident Provi CM20 培养监测系统的细胞增殖/毒性评估能力，我们进行了以下两项检测，以将 CM20 系统与传统检测 (WST-8) 进行比较： 抗癌药物 (5-FU) 对人肺腺癌 A549 细胞的细胞死亡检测 神经毒素 (6-OHDA) 对人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞的细胞死亡检测
Science | 破除抑制性肿瘤微环境，改良 CAR-T 可靶向实体瘤
。 然而科学家们逐渐发现了单独使用 IL-2 进行体外扩增带来的负面影响：这种快速扩增方案在体外培养的过程中诱导了效应 T 细胞的终末分化，从而降低了它们在体内的长期存活率和抗肿瘤效果。并且 IL-2 在促进活化 T 细胞扩增的同时，同样能够促进调节性 T 细胞（Treg）的扩增和存活。Treg 作为免疫抑制性的 T 细胞表型，在体内的肿瘤微环境中会抑制 CD8+T 细胞对癌细胞的杀伤作用并抑制 CD8+ 记忆 T 细胞的分化。因此在体外培养的过程中控制 Treg 细胞的比例也成为了课题
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