23132/87(人胃癌细胞)

细胞名称	23132/87（人胃癌细胞）
别名	23132/87
生长特性	贴壁上皮细胞融合生长
传代方法	1:2传代
生长方式	不适用
培 养 基	RPMI1640+10%FBS
培养体系	温度：37℃ ，     气相：95%空气 ，5%CO2
细胞背景	1987年从一位72岁的胃腺癌患者的原发肿瘤中建立
冻存条件	完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO，液氮

物种：人类（智人）
组织：胃
疾病：胃腺癌
支原体：用环丙沙星（Ciprobay）消除污染，然后用DAPI、微生物培养、RNA杂交检测呈阴性
免疫学：细胞角蛋白+，细胞角蛋白-7+，细胞角蛋白-8+，细胞角蛋白-17+，细胞角蛋白-18+，细胞角蛋白-19+，结蛋白-，内皮细胞-，EpCAM+，GFAP-，神经丝-，波形蛋白-；（最初的数据显示阴性，我们发现细胞表达细胞角蛋白-7）
指纹图谱：小卫星标记的多重PCR显示了一个独特的DNA图谱
物种：经AST、MDH等IEF鉴定为人类
细胞遗传学：具有12%多倍体的人类超四倍体核型-47（45-52）<2n>XY，+20，t（1；15）（p11；p11），t（6；12）（p21；q21），i（13q），t（13；14）（p10；q10）-与已发表的核型非常相似
病毒ELISA：逆转录酶阴性；PCR：EBV-、HBV-、HCV-、HHV-8-、HIV-1-、HIV-2-、HTLV-I/II-、MLV-、SMRV-

细胞收到后处理：
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松）
细胞培养步骤：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右完全培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。