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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
358
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
100ml|500ml
特别提示:包括吕氏碱性美蓝染色液(0.4%)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:吕氏碱性美蓝染色液(0.4%)
产品货号:GL2722
产品规格:100ml|500ml
用途:
酵母菌镜检染色,鉴别酵母细胞的死活
注意事项:
主要由美蓝、酒精、氢氧化*等组成。由于活细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母菌活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
储存条件:室温,避光,12个月
除了吕氏碱性美蓝染色液(0.4%),,我公司还供应以下相关产品:
名称:Masson三色染色试剂盒
货号:BTN131272
规格:6×100mL
Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中zuì经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或*胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(*胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
产品特点:
?染色稳定。
? 分化时间短,一般仅需1~2秒。
? 色彩清晰鲜艳。
?适用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色。
? 所染切片保存时间长且不易褪色。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100mL |
| 溶液B | 100mL |
| 溶液C | 100mL |
| 溶液D | 100mL |
| 溶液E | 100mL |
| 溶液F | 100mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温运输,室温避光保存,有效期一年。
使用方法:
1.切片常规脱蜡至水,如用Zenker液固定,应进行除汞处理。
2.用溶液A染色5~10分钟。
3.在95%乙醇中洗2次。
4.用溶液B(酸性乙醇分化液)分化,分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
5.在流水中洗,蒸馏水洗。
6.在溶液C中复染5分钟。
名称:线粒体超氧化物染色试剂盒-M13
货号:HR0593
规格:30T/50T
M13线粒体超氧化物染色/检测试剂盒是利用M系列探针进行线粒体超氧化物特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的M13线粒体超氧化物染色探针为红色荧光标记的线粒体探针,具有510/580nm 的zuì大激发/发射波长。
M13线粒体超氧化物染色探针是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料,该探针可以选择性标记线粒体,包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞,即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦进入线粒体后,快速被超氧化物氧化,并产生红色荧光。M13线粒体超氧化物染色探针只可被超氧化物氧化,而不被其他活性氧类(ROS)和活性氮类(RNS)氧化。氧化产物结合核酸后,可产生大量红色荧光。
储存条件:染料-20℃避光保存;避免反复冻融;稀释液2-8℃保存。
按每个样用200μl染料计,试剂盒可以做30-150个样或60-300个样;
按每个样用100μl染料计,试剂盒可以做60-300个样或120-600个样。
有效期:六个月。
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
产品更新:我公司会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。需要zuì新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全:使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应立即用水冲洗。
注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS ● HBSS ● 离心机 ●荧光显微镜/激光共聚焦显微镜
使用方法:
使用注意事项:
● M13染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO 溶液集中于管底。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定zuì佳条件。以下方法仅供参考。
●染色后立即进行分析。
1.染色工作液配制:
根据样本数量,用染料稀释液将M13荧光染料10倍稀释,再用HBSS缓冲液或者相应的培养基10-50倍稀释,配制成染色工作液。
【注】:
● 也可以直接用HBSS 等缓冲液或相应的培养基稀释M13染料母液至所需浓度。
● 建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。
● 开始实验前,使用培养基或HBSS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。工作浓度为根据不同细胞的预实验结果确定的zuì佳工作浓度,一般染色终浓度100-500倍稀释。
● 为了降低过度加载染料导致的线粒体毒性,在不影响实验结果的前提下应尽可能低浓度染色。
● 工作液现配现用。
● 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
2.细胞染色
2.1对于贴壁细胞
1)培养皿/培养板准备细胞样本。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育10分钟~30分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
【注】:
● 也可以将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液。
【注】:
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
4)荧光显微镜(含合适滤片)或激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪下观察。zuì大激发/发射波长为510/580nm。
2.2对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30分钟~2小时(具体时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。zuì大激发/发射波长为510/580nm。
【注】:
●对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
● 如果需要盖玻片上固定化的细胞,那么可在铺片前可以先用多聚赖氨酸(poly-D-lysine)包被载玻片或盖玻片。
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
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文献和实验染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。 三、菌种酿酒酵母的斜面培养物 染液:吕氏碱性美蓝染液 四、操作步骤 制备酵母菌的菌悬液——在载玻片中央滴加1滴吕氏——碱性美蓝染色液——滴加1滴酵母菌的菌悬液于染色液中——盖上盖玻片——放置3分钟——高倍镜下观察——30分钟后再观察 五
体积小,较透明,如未经染色常不易识别,而经着色后,与背景形成鲜明的对比,使易于在显微镜下进行观察。 三、器材 显微镜,酒精灯,载玻片,接种环,双层瓶,擦镜纸,生理盐水; 吕氏碱性美蓝染色液,石炭酸复红染色液; 金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌。 四、操作步骤 1.涂片 取两块干净的载玻片,各滴一小滴生理盐水于载玻片中央,用无菌操作(图Ⅳ-1,具体操作参照实验一),分别挑取金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌于二载玻片的水滴中
2.1 美蓝染色法 2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液 美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液 100mL 将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。 2.1.2 染色法 将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。 2.1.3 结果 菌体呈蓝色。
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