Oct4-GFP报告基因质粒

特别提示：包括Oct4-GFP报告基因质粒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Oct4-GFP报告基因质粒
英文名称：Oct4 GFP Reporter Plasmid
产品货号：SY0190
产品规格：1μg

OCT4-GFP报告基因是用于检测OCT4转录活性水平为目的的报告基因。Oct4是参与调控胚胎干细胞自我更新和维持其全能性的最为重要的转录因子之一，同时也是体外建立诱导多功能干细胞（iPS）的关键基因。

OCT4-GFP报告基因主要用于检测细胞中Oct4信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMOCT4-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个OCT4结合位点，可以高效地检测OCT4的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得OCT4-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM OCT4 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMOCT4-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

除了Oct4-GFP报告基因质粒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：STAT1萤火虫荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0062
规格：1μg
STAT1-Luc荧光素酶报告质粒（报告基因质粒）（STAT1 luciferase reporter plasmid）是用于检测STAT1转录活性水平为目的的报告基因。STAT1(signal transducer and activator of transcription 1)对先天性免疫起关键性作用，具有抑制细胞生长、介导细胞凋亡的信号传导和抗肿瘤作用等。

STAT1报告基因主要用于检测细胞中干扰素γ诱导的信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi表型分析等。

pGMSTAT1-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个STAT1结合位点，可以高灵敏度地检测STAT1的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得STAT1报告基因质粒更易于转染。


质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
1.pGMSTAT1-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.STAT1的激活剂，可作为STAT1报告基因的阳性对照。

储存条件：-20℃。

名称：YY1 Luc荧光素酶报告基因质粒
货号：SY0143
规格：1μg
YY1 Luc荧光素酶报告基因质粒(YY1 luciferase reporter plasmid)是用于检测YY1转录活性水平为目的的报告基因。YY1是锌指蛋白类转录因子GLI-Kruppel家族成员之一，主要参与细胞增殖调控、细胞分化以及胚胎发育等。

YY1 Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于YY1信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMYY1-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个YY1结合位点，可以高灵敏度地检测YY1的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得YY1报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMYY1-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：PPARγ-GFP报告基因质粒
货号：SY0163
规格：1μg
PPARγ GFP Reporter Plasmid是用于检测PPARγ转录活性水平为目的的报告基因。PPAR(peroxisome proliferator-activated receptor)是调节靶基因表达的核内受体转录因子超家族成员，可分为α、β和γ三种类型。其中PPARγ主要表达于脂肪组织及免疫系统，与脂肪细胞分化、机体免疫及胰岛系统抵抗关系密切。

REPOTMPPARγ-GFP报告基因主要用于检测细胞PPAR 信号通路中PPARγ的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMPPARγ-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个PPARγ结合位点，可以高效地检测PPARγ的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得PPARγ-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGMPPARγ -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMPPARγ-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经吉满生物允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：C/EBPβ-GFP报告基因质粒
货号：SY0209
规格：1μg
C/EBPβ-GFP报告基因是用于检测C/EBPβ转录活性水平为目的的报告基因。C/EBPβ(CCAAT/enhancer-binding protein beta)是转录因子C/EBPs家族的重要成员，它主要通过对靶细胞基因转录的调节，参与细胞增殖与分化、肿瘤发生与凋亡、细胞周期调控等。

C/EBPβ-GFP报告基因主要用于检测细胞中C/EBP信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMC/EBPβ-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个C/EBPβ结合位点，可以高效地检测C/EBPβ的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得C/EBPβ-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM C/EBPβ-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMC/EBPβ-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

名称：腔肠素f
货号：SY0237
规格：1×500μg
本品为粉末形式供应的腔肠素f（Coelenterazine f），与天然腔肠素结构上的*一差别在于将其R-1位酚基上的羟基替换成氟（F），是水母发光蛋白（aequorin）的首*底物。当腔肠素f和水母蛋白（Apoaequorin）一起被部分氧化得以活化，生成腔肠素的亚稳态复合物（aequorin）。与天然腔肠素-水母蛋白（Apoaequorin）复合物产生的光子总数相比，此复合物仅产生80%的光子能。但是其优点在于：仅需非常少的时间来生成aequorin复合物（通常来说此步反应很慢，比如60min内仅有40%的天然腔肠素完成反应）。另外，当其与Ca2+接触，即可快速且高产量的发光，产能强度是天然腔肠素的20倍。具有最好的细胞渗透性。当需要极高的Ca2+检测灵敏度来研究水母蛋白再生实验，推荐使用本底物。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，1）能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂；虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物（见附录1，腔肠素及其衍生物的特性）。

CAS：123437-16-1
分子式：C26H20FN3O2
分子量：425.46
外观：黄色至褐色粉末
溶解性：溶于*醇或者乙醇，不可溶于DMSO
纯度：＞95%（TLC）
结构：



运输和保存方法：冰袋运输。粉末-20℃避光干燥保存，最好保存在惰性气体下以避免接触空气。

注意事项
1）腔肠素f粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成f氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。