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低温
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臻诺生物
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100 μl
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文献和实验问:实验室最近用gelred代替EB,我是直接把gelred稀释到6X Loading Buffer 中,2ml上样缓冲液加分别加入1微升,2微升--10微升的gelred,同时marker充当样品点样。结果跑出来的条带悲剧了,puc57的条带显示在3000以上,也就是样品跑得慢,marker跑得快!而且跑双marker时,显示的条带也不一致。还试验了另一种方案,做胶时直接把gelred加到溶胶液中,50ml的溶胶液加5微升
背景低,染料灵敏度高,分辨率强。 而某假货GelRed和EB背景亮度相当。另外在使用过程中:发现biotium的GelRed染料呈鲜艳的紫红色,加入后极易扩散,不会挂在烧瓶壁上,而假货生物的染料呈暗淡的红色偏褐,加入时不易扩散,需摇晃才能扩散,且扩散后颜色偏土黄。 就实验特征而言,假货经销商的gelred和EB的添加效果非常相似,怀疑其中有添加EB或goldview。 图1 原装GelRed、假货GelRed、DuRed及EB四种核酸凝胶染料的效果对比图。所使用的样品均采用
目前市场上几种代表性的核酸染料: GelRed是一款集高灵敏度、低毒性和光稳定性于一体的核酸凝胶染料。由于染料分子不能透过人体细胞膜,保证了实验环境的安全与洁净。该产品已通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,不会造成任何环境污染。 EB (溴化乙啶)是早期分子实验中常用的小分子核酸凝胶染色剂,但染色效果并不灵敏,背景荧光信号太强,分辨率不高。最重要的EB是一种高诱变性致癌的化学物质。 SYBR Green I和 SYBR Gold 也被厂家宣传为灵敏
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