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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 供应商:
臻诺生物
- 规格:
50 μl
KGMP006|Lyso‑Tracker Red (溶酶体红色荧光探针) 凯基 KeyGEN
货号:KGMP006;规格:500 μL(1 mM in DMSO,1000× 储存液)凯基生物英文:Lyso‑Tracker Red(DND‑99);pKa≈5.1CAS:231946‑72‑8;分子量:399.25品牌:凯基 KeyGEN;仅限体外科研实验,禁止临床诊断、人体使用储存:‑20℃棕色瓶密封避光保存;有效期 12 个月;严禁反复冻融,全程避光,隔绝水汽凯基生物用途:活细胞溶酶体特异性标记;观测溶酶体形态分布、酸化水平、自噬流;可与 LysoBlue、LysoGreen 做多色共定位成像;仅活细胞体外实验,不可用于固定样本、人体实验形态:深红色澄清 DMSO 溶液。
实验简述:DMSO 1 mM 母液,工作终浓度常用 50‑75 nM;弱碱性嗜酸性活细胞探针,自由穿透细胞膜,进入酸性溶酶体发生质子化并滞留富集;仅适用于活细胞,固定处理后荧光信号完全丢失;37℃细胞孵育 30‑120 min;光谱:Ex 577 nm,Em 590 nm,红色荧光,适配 TRITC/Rhodamine 滤片组;适合共聚焦、荧光显微镜、流式细胞术,观测溶酶体形态、分布、数量、自噬及溶酶体功能相关活细胞成像;工作液现配现用,避光操作;避免长时间孵育,防止探针引起溶酶体碱化效应。外观:深红色澄清 DMSO 溶液pKa≈5.1凯基生物光谱参数:Ex 577 nm,Em 590 nm,红色荧光,匹配 TRITC 滤片组溶解性:探针易溶于 DMSO、DMF;进入活细胞后质子化滞留酸性溶酶体特点:嗜酸性富集,溶酶体内酸性越强荧光越强;只标记活细胞酸性细胞器;固定处理荧光丢失;高浓度或长时间孵育会改变溶酶体 pH,干扰检测。稳定性:‑20℃避光稳定;光照、室温久放荧光衰减失效;水溶液中探针不稳定。
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文献和实验)也跟pH值有关。作者根据这个特性,采用双光子显微镜可以一秒一秒地跟着活体细胞内pH值变化。 作者采用红色荧光探针,为多颜色多通道成像研究保留了绿色荧光波长的通道作为其他细胞特性的研究(如能量代谢等)。 参考文献:J. Am. Chem. Soc. doi:10.1021/ja202902d (2011) 原文内容: Nature News: A microscopist’s litmus test Jun 23, 2011 Vol.474
基的探针的共价连接。 绿色、黄色和红色荧光染料的激发和发射光谱。DyLight488、549和649是替代荧光素(绿色), 罗丹明 (红色)和其他传统荧光染料的高强度、光稳定性好的荧光染料。我们提供标记的二抗和链亲和素偶联物,还提供用于标记其他蛋白的同氨基、巯基反应的这些荧光素衍生物。 荧光标记 荧光标记是将荧光基团共价连接到蛋白、核酸等分子 上的过程。通常使用能够选择性地与目标分子上存在的功能基团反应的荧光素基团衍生物来完成这样的过程。最常见的标记
3|MitoTracker 标记下不同线粒体网络形态 四、线粒体ROS:看氧化应激有没有升高 线粒体超氧阴离子升高常与电子传递链异常同时出现。 MitoSOX Red是常用的活细胞线粒体超氧阴离子探针,可以通过荧光显微镜或流式细胞术检测。探针进入线粒体后被氧化,荧光信号增强。 注意要点:重点控制探针浓度、孵育时间、细胞密度和曝光条件。染色结束后尽快检测,也能减少探针自身氧化和光照带来的额外背景。 图4丨MitoSOX Red检测线粒体ROS水平 五、线粒体
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