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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 供应商:
臻诺生物
- 规格:
15×15cm/张,5张/包装
凯基 KGP115‑1 NC 膜(pall 分装,0.2 μm)
货号:KGP115‑1,科研专用,不可临床诊断Pall BioTrace™ NT 原装硝酸纤维素 NC 膜,凯基分装,孔径 0.2 μm;适合小分子蛋白(≤20 kDa)Western‑blot 转印,防止小蛋白过转穿膜,也可用于菌落 / 噬菌斑影印、斑点杂交、核酸转印凯基生物。
核心特性
- 基材 Pall BioTrace NT 纯硝酸纤维素膜,蛋白结合能力约 209 μg/cm²,低非特异性背景,兼容化学发光 ECL、丽春红 S、胶体金、DAB 显色、同位素检测、荧光检测等多种检测方式。
- 0.2 μm 小孔径,专门针对分子量≤20 kDa 小分子蛋白,显著降低转印过程中小蛋白穿膜丢失;分子量>20 kDa 优先选用 0.45 μm 版本 KGP115凯基生物。
- NC 膜特点:无需甲醇活化,转膜缓冲液直接浸润即可;可丽春红可逆染色,染色洗除后膜可继续孵育抗体;机械强度弱于 PVDF 膜,操作避免硬折、尖锐刮划。
注意:膜避免手触碰蛋白结合面,佩戴无粉手套,边缘夹持。
规格参数
- 孔径:0.2 μm
- 单片尺寸:15 cm×15 cm
- 包装:5 张 / 盒(Pall 原装膜凯基分装)
- 储存条件:室温干燥避光保存,防潮,有效期 24 个月;禁止潮湿、挤压折叠
- 发货:常温避光发货
简要操作要点(WB 蛋白转印)
- 裁剪所需尺寸,无粉手套拿取膜边缘;纯水或者转印缓冲液浸润完全(无需甲醇)。
- 按常规 Western blot 进行转膜;小分子蛋白可适当降低转膜电压 / 缩短转膜时间,减少过转。
- 转印完成可用丽春红 S 可逆染色观察蛋白条带,水洗去除丽春红后,再封闭、一抗二抗孵育。
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文献和实验时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途--因为经不起多次“折磨”。选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。另外还要注意选择纯的NC膜--混有含醋酸纤维(CM)的NC膜结合力会有所降低。另外提醒一句:由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替,因此在封闭时最好使用较温和的Tween20,而且浓度不要超过0.3%(据说0.05
多次重复清洗的用途--因为经不起多次“折磨”。选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。另外还要注意选择纯的NC膜--混有含醋酸纤维(CM)的NC膜结合力会有所降低。另外提醒一句:由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替,因此在封闭时最好使用较温和的Tween20,而且浓度不要超过0.3%(据说0.05%效果最好)。一般而言,NC膜越纯,其蛋白结合能力就越高
染料 常规染色, 比较于NC膜,可用考马斯亮蓝染色,可用于ECL检测,快速免疫检测。 适用范围 0.45um 一般蛋白 0.2um一分子量小于20kD蛋白 0.1um一分子量小于7kD蛋白 低浓度小分子蛋白、酸性蛋白、糖蛋白和蛋白多糖(主要用在核酸检测中) 糖蛋白检测和蛋白质测序 价格 价格较便宜 便宜 较贵 1. 硝酸纤维素膜 硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧
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