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- 凯基
- 江苏
- KGA1028H
- 2026年10月10日
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- 保存条件：
低温
- 供应商：
臻诺生物
- 规格：
20 tests
KGA1028H 凯基 KeyGEN 端粒酶活性荧光实时定量 PCR 法检测试剂盒（人）
货号：KGA1028H（20T）；KGA1029H（50T），科研专用，人源样本专属；SYBR Green RT‑qPCR，检测人 hTERT mRNA，间接反映端粒酶活性；衰老、肿瘤课题经典分子指标，搭配 KGPAG001 SA‑β‑Gal 衰老染色试剂盒使用
📦实物包装与组分
- Maxima SYBR Green qPCR Master Mix(2×)：250 μL
- Nuclease-free Water：1.3 mL
- hTERT-F Primer（干粉 1 OD，人 TERT 上游引物）
- hTERT-R Primer（干粉 1 OD，人 TERT 下游引物）
- hGAPDH-F Primer（干粉 1 OD，人内参上游）
- hGAPDH-R Primer（干粉 1 OD，人内参下游）
KGA1029H（50 Tests）：Mix 700 μL，无酶水 1.8 mL，引物同样 4 支干粉。引物干粉需用无酶水溶解配成 100 μM 储存液，再稀释为 10 μM 工作液使用。
🧪检测原理
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型，绿色荧光)为例) TUNEL检测：使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min，再使用二甲苯脱蜡2次，每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
在检测试剂盒的设计上。典型 HMT 检测试剂盒用 3H-SAM 作甲基供体，并将 S-腺苷高半胱氨 酸 (SAH) 测定为甲基化反应的一般副产物。但是，这需要 处理放射性物质 较高的灵敏度，以克服甲基供体 SAM 的低 kcat（转化数通常 预先纯化酶/蛋白复合物，以评估特定 HMTs 的活性 比色或荧光检测简便，无放射性 与核提取物或纯化蛋白的相容性（检测试剂盒对目标修饰具有特异性） 3 小时内即可提供数据 表征去甲基酶活性 组蛋白去甲基化酶活性检测试剂盒通常测定
特异性反应。应用荧光素标记抗体使之与预先已固定在DEAE膜上的样品DNA特异性结合，对DEAE膜上的荧光素进行扫描得到5mC的水平，其荧光素强度与5mC水平成正比。Oakeley等1997年[23]报道了这种方法。这种方法需要精密的仪器。 2.1.4 氯乙醛法 Oakeley等1999年[24]首先描述了这种使用氯乙醛和荧光标记的方法。首先，将DNA经重亚硫酸盐处理使未甲基化的胞嘧啶全部转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变（Frommer等1992年）[25]，然后经过银或色谱柱去除DNA链
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