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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
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- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
ST2/o
小鼠杂交瘤细胞_ST2/o培养物污染往往是细胞培养实验室最常遇到的问题,有时会带来十分严重的后果。污染物主要分为两类,一类是化学污染物,另一类是生物污染物。尽管无法彻底消除污染,但是可以通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术,降低污染发生的频率和严重程度。
传授细胞培养基本方法
细胞复苏步骤
一、所需仪器:
1)离心机
2)生物安全柜
3)电动移液器
4)CO2培养箱
5)倒置显微镜
6)液氮罐
7)恒温水浴锅
二、所需试剂:
1)胎牛血清(FBS)
2)无菌1×PBS pH=7.2
3)完全培养基
三、所需耗材:
1)离心管(15ml、50ml)
2)T-25细胞培养瓶
3)一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
四、操作步骤:
1.将恒温水浴锅中的水预热到37℃;
2.从液氮罐中取出要复苏的细胞,尽快转入恒温水浴锅中复温,工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率;
3.将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中,充分混匀后,300g离心5min;
离心完成后弃去上清,用1ml完全培养基重悬细胞后,转入T-25细胞培养中,再加完全培养基4ml,之后转入CO2培养箱中培养静置。
细胞冻存步骤
一、所需仪器:
1)-86℃超低温冰箱
2)离心机
3)生物安全柜
4)电动移液器
5)CO2培养箱
6)倒置显微镜
7)液氮罐
二、所需试剂:
1)胎牛血清(FBS)
2)细胞培养级DMSO
3)冻存液:80%FBS+20%DMSO
4)无菌1×PBS pH=7.2
5)消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA isopropanol
三、所需耗材:
1)离心管(15ml、50ml)
2)T-25细胞培养瓶
3)一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
4)1.8ml冻存管
5)程序降温盒
四、操作步骤:
- 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,吸弃瓶内的培养基;
- 向培养内加入无菌1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃PBS;
- 重复步骤2一次,之后向瓶内加入消化液1ml,轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min;
- 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,如还有部分细胞为消化下来,可在生物安全柜内用移液管吸起消化液,吹打培养平面;
- 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化,然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中,300g离心5min;
- 离心完成后,弃上清,用0.5mlFBS重悬细胞,再加入0.5ml冻存液,用移液管充分混匀,之后转入1.8ml冻存管中;
- 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
- 第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。
产品图片:
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文献和实验脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(P3-X63/Ag8)融合,融合的细胞既获得了亲代脾细胞分泌特异性抗体的特性,又具有骨髓瘤细胞大量繁殖的能力,成为一种既能分泌特异性抗体又能长命的杂交瘤细胞。该技术为抗体的分子生物学研究提供了全新的手段。极大地促进了免疫学,遗传学,分子生物学的快速发展。 但传统抗体目前也面临诸多问题,如: 每使用一管新抗体都需要进行滴定测试; 多种同型对照,实验设计繁琐; 需要添加Fc阻断试剂; 抗体不佳,阳性细胞群不明显; 抗体作为细胞生物学和生物化学中最重要的试剂之一,科学界每年在这类
率及所产生的杂交瘤细胞系的稳定性等方面均可与PS-X63-Ag8或P3-NS1/1-Ag4-1相比拟。 4.小鼠P3-X63-Ag8-U1(1980年Sharon)。是P3-X63-Ag8骨髓瘤细胞系的变系。P3-X63-Ag8分泌重链(rl)和轻链(K),P3-NS1/1-Ag4-1则只合成而不分泌轻链(K)。 5.小鼠SP2/O-Ag14(1978年Shulman)。Kohler等将PS-X63-Ag8骨髓瘤细胞系与具有抗绵羊红细胞活性、产生r2b重链和K轻链的BALB/c小鼠
物。 产品的应用:杂交瘤细胞和淋巴细胞来源的分化细胞的无血清培养。 LONZA SFM无血清培养基产品订购信息 通用无血清培养基 Lonza 12-725F UltraCULTURE Serum-free Medium, w/o L-Gln,500ml Lonza 12-743F UltraMEM with ITES with L-Gln, 500ml Lonza 12-745F UltraMEM w/o L-Gln 500ml
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