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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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文献和实验值比率( 495/280 或 550/280 ),选取适当组分合并。 生物素标记抗体 抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高!这种方法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基与酰化的生物素共价结合,生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料-链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。 操作步骤 1.用无水 DMSO 配制 10mg/ml 生物素 N- 羟基琥珀酰亚胺酯溶液。 2.硼酸盐缓冲液(0.1mol/L, pH8.8
NaCl,1 mM EDTA.Na2 (pH8.0),0.1% 十二烷基肌氨酸钠 (SLS)配制方法: 用 Tris.HCl、NaCl 和 EDTA 母液,加入各成分确切含量后,15 磅高压 15 分钟,待溶液冷却至 65 ℃ 时,加入预先在 65℃ 水浴 30 min 的 10% SLS,至终浓度为 0.1%。也可用 0.05M 柠檬酸钠代替 Tris.HCl。然后用 0.1%DEPC 处理整个缓冲液。(4)洗脱缓冲液: 10 mM Tris.HCl (pH7.6),1 mM EDTA.Na
-HCl,pH6.7;下层胶则是高浓度的小孔胶,称为分离胶或电泳胶,成胶的缓冲液是Tris-HCl,pH8.9。电泳槽中的电极缓冲液则是Tris-甘氨酸,pH8.3。可见,凝胶浓度、成胶成分、pH与电泳液缓冲系统各不相同,形成了一个不连续系统。 电泳时,蛋白质样品放置在浓缩胶上,为防止蛋白质样品在电极缓冲液中扩散,因而加入等体积的40%蔗糖或50%甘油与之混合,以提高密度;为观察蛋白质样品泳动的情况,样品中还加入溴酚蓝等示踪染料,这些有色物质的分子 比任何一种大分子物质泳动的速度都快,只要染料
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