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100
- 细胞类型:
科研
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
293E
稳定表达EBNA1的人胚肾细胞_293E主要来源ATCC、ScienCell、DSMZ、以及少数国内外著名大学建系
细胞培养简介:
什么是细胞培养?细胞培养是从动物或植物中取出细胞,然后使其在合适的人工环境中生长。这些细胞可于培养前直接从组织中取出并采用酶或机械方法进行解离,或者也可来自已经建立的细胞系或细胞株。
1)原代培养:
原代培养是指将细胞从组织中分离后,使其在合适的条件下增值直到占据所有可用基质(即:达到汇合状态)的培养阶段。在此阶段。必须将细胞转移到新的容器中并更换新鲜培养基,从而对细胞进行传代培养,为其提供更多继续生长的空间。
2)细胞系:
首次传代培养后,原代培养物即被称为细胞系或者亚克隆。来自于原代培养的细胞系寿命有限(即:有限细胞系,见下文),随细胞的传代,生长能力最强的细胞会占据优势,最终导致细胞群体在基因型和表型上达到一定程度的均一性。
3)细胞株:
如果将细胞系的一个亚群通过克隆或者其他方法从培养物中明确地选择出来,则次细胞系就成为一个细胞株。与亲代细胞系起始时相比,细胞株往往会获得其他一些遗传学改变。
培养环境:
细胞培养的一大优势在于能够控制细胞生长的物理化学环境(即温度、pH值、渗透压、O2和CO2压力)和生理环境(即:激素和营养素浓度)。除温度外,培养环境均由生长培养基控制。
虽然细胞培养的生理环境不如其物理化学环境明确,但是通过对血清成分更好地了解、确定细胞增殖所需的生长因子以及更好地了解培养过程中的细胞微环境(即:细胞间相互作用、气体扩散、细胞-基质相互作用),现在可以采用无血清培养基进行一些细胞系的培养。
稳定表达EBNA1的人胚肾细胞_293E培养基的选择和使用:
MEM:成分简单,推荐贴壁细胞使用。
DMEM:分高糖型和低糖型。
IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养。
RPM1640:应用最广泛的培养基之一。推荐悬浮细胞培养使用,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞。
199、109培养基:成分齐全,培养效果较好。
F10培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养。
F12培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养。
McCoy’s5A培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。"95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
产品图片:

【细胞检测】:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】:详见细胞说明书
【传代方法】:建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】:详见细胞说明书
【主要文献】:请具体查阅相关发表文章
产品优势:
烜雅生物公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养PBS量是10%,如果出现细胞状态不良情况,可以提高PBS量到15%,待细胞稳定后,调回PBS量10%,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送
造成实验室细胞污染常见情况总结:
细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。
违规操作:
1. 为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验。
2. 器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用。
3. 超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验。
4. 不带手套,徒手操作。
5. 细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。
稳定表达EBNA1的人胚肾细胞_293E专用物品被带出细胞房使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。
1,超净台和桌面,东西太多太乱
2,箱太久没清洁
3,细胞房人多口杂,难管理:
希望这些培养的方法可以帮到您
稳定表达EBNA1的人胚肾细胞_293E(相关产品):
| KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株 | G422 |
| 615小鼠网织细胞性白血病瘤株 | L615 |
| Walker氏癌肉瘤256瘤株 | W256 |
| C57小鼠黑色素瘤瘤株 | ME |
| KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株 | B22 |
| 小鼠Lewis肺癌瘤株 | LLT |
| 615小鼠前胃癌瘤株 | Fc |
| 小鼠乳腺癌细胞株 | EMT-6 |
| 小鼠肾癌细胞株 | RuCa |
| 大鼠肉瘤细胞 | WK256 |
| 小鼠乳腺癌细胞 | MA891 |
| 大鼠胰腺癌细胞株 | DSL-6A/C1 |
| 小鼠骨髓瘤细胞 | NS1 |
| 大鼠卵巢癌细胞株 | NUTU-19 |
| 小鼠肾癌细胞 | Ranca |
| 小鼠胚胎成纤维细胞 | 3T3-swiss albino |
| 小鼠胚胎成纤维细胞 | 3T3 clone A31 |
| 小鼠胰腺腺泡细胞癌细胞 | MPC-83 |
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文献和实验Growth, Maintenance and Transfection of Suspension Adapted 293-EBNA cells
Procedure I. INTRODUCTION The 293 EBNA cell line is established from primary embryonal human kidney cells transformed with sheared human adenovirus type 5 DNA and Epstein-Barr virus nuclear antigen 1, allowing episomal amplification
人类组织正常及永生化细胞293E E转化人胚肾293细胞(B类)293ET ET转化人胚肾293细胞(B类)293KB KB转化人胚肾293细胞(B类)293T 人胚肾T细胞A7d 野生型人C-KIT受体细胞株(B类)AMS3(SCF3) 人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类)APP-PS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)(B类)FC33 ASP2 人胚胎肾细胞转化细胞(B类)FIP293 FIP293(来源于HEK293)(B类)HEK-293 人胚肾细胞
起始序列和病毒包装信号序列,并插入了腺相关病毒的rep基因和两端的ITR序列,目的基因则插在腺相关病毒的两个ITR之间。这样的载体既具有单纯疱疹病毒能够进入并定位于细胞核的特点,又具有腺相关病毒能够扩增外源基因并将其整合在人类非分裂细胞染色体特定位置的特点;同时,也克服了前者不兼容外源启动子的弱点,避免了后者包装容量低的不足。离体实验证明,受单纯疱疹病毒/腺相关病毒嵌合载体感染的分裂细胞经过一定时间的选择后,可以形成稳定表达目的基因的细胞克隆,且对细胞的毒性很小。 (2)腺病
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