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- RayBiotech
- AAH-CYT-G8
- 2025年07月11日
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玻片芯片
RayBio® Human Cytokine Antibody Array 7 (60) Antibody List
半定量检测60个指标
| Acrp30/ Adiponectin | FGF-9 | IL-2 Ra | Oncostatin M (OSM) |
| AgRP | GCSF | IL-6 R | Osteoprotegerin (OPG) |
| Amphiregulin (AR) | GITR | IL-8 | PlGF/PGF |
| Angiopoietin-2 (ANG-2) | GITR Ligand | IL-11 | sgp130 |
| Axl | GRO (CXCL1, 2, 3) | IL-12 p40 | sTNF RI/ TNFRS1A |
| bFGF/ FGF2 | GRO alpha/ CXCL1 | IL-12 p70 | sTNF RII/ TNFRS1B |
| bNGF | HCC-4/ CCL16 | IL-17 | TECK/ CCL25 |
| Betacellulin (BTC) | HGF | I-TAC/ CXCL11 | Thrombopoietin (TPO) |
| CCL28 | ICAM-1 | Lymphotactin/ XCL1 | TIMP-1 |
| CTACK/ CCL27 | ICAM-3 | MIF | TIMP-2 |
| Dtk | IGFBP-3 | MIP-1 alpha/ CCL3 | TRAIL R3/ |
| EGF-R | IGFBP-6 | MIP-1 beta/ CCL4 | TRAIL R4 |
| ENA-78/ CXCL5 | IGF-I SR | MIP-3 beta/ CCL19 | uPAR |
| Fas / TNFRSF6 / CD95 | IL-1 R4 / ST2 | MSP (alpha chain) | VEGF-A |
| FGF-4 | IL-1 RI | NT-4 | VEGF-D |
一、实验原理
该芯片采用夹心法，其原理是将捕获抗体预先固定在固相载体上，生物样品加入到芯片上一起孵育反应后，其特异性的抗原与捕获抗体结合，然后加入生物素标记的检测抗体一起孵育，最后通过HRP-链霉亲和素与化学发光底物、或者荧光染色剂-链霉亲和素结合作为信号检测。基于“三明治”双抗体夹心法建立的芯片，高品质的抗体对是此方法的关键，夹心法有很高的灵敏度，检测浓度可以低至1-10 pg/mL;每增加检测一个蛋白，芯片上就需要增加一个抗体对，这样可能出现交叉反应，因此需要将每个抗体对与芯片上其他抗体对进行检测，验证是否可以引入这个抗体对，且不对其他抗体对检测造成干扰，通过优化筛选将交叉反应降到最小。
由于抗体对之间可能存在的相互影响，夹心法抗体芯片一次性检测蛋白的数量有所限制，但是可以用于蛋白的定量检测。目前，RayBiotech验证配对的抗体对有大于600种抗体对，基于双抗体夹心法开发的半定量芯片有40多种，定量抗体芯片有大于45种，涵盖的因子450多个，包括炎症因子、凋亡因子、生长因子、肥胖因子、血管因子、信号转导磷酸化、白介素等等各个疾病相关的因子。夹心法芯片具有特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好的优点。
二、实验原理图：
三、芯片载体的区别和选择：
RayBiotech 的芯片共有2种载体，一种是膜载体，一种是玻片载体。
1. 膜载体，就类似于Western Blot 实验采用的NC膜或PVDF膜，采用ECL化学发光作为显色信号，这种膜载体相对玻片载体使用时，需要等多一些样品用量，但凡是可以用于WB实验室的都可以使用RayBiotech的膜芯片，通用性高。
2. 玻片载体，是采用载玻片一样的玻璃片作为芯片载体，用Cy3或Cy5，绿色荧光信号作为显色信号，样品用量少，但需要与基因芯片通用的荧光扫描仪。
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文献和实验芯片的构建和阅读摘要制作芯片和获得芯片的数据有许多不同的方法。这里我们介绍了在学术领域中两种芯片的构建和使用。除了详细说明了技术细节外，我们还对组成和方法的优缺点进行了评论，同时还介绍了杂交的方法。用我们所建立和使用芯片的方法来回答生物领域问题的事实证明了这种技术在大学的环境下是可行的。一种获得基因功能信息的高通量的方法是cDNA芯片。在一块显微镜载玻片上包含了几百至几千个固定的DNA样本，以类似于Northern blot 和Southern blot的方法进行杂交。了解了这个方法
结果的快速扫描成像和分析。该系统具有标准的双重滤光器和激光，可同时获得Cy3TM和Cy5TM染料的结果和一些其他染料的结果。AQuire由于对PMT实时控制和对扩大信号的调整，使其具备了高灵敏度。AQuire还具有较好的灵活性，能对大范围的扫描面积和芯片类型（包括没有盖玻片的湿制备芯片）进行扫描成像。产品：DNA Microarray Scanner 厂家：Agilent Technologies 产品描述：技术上进一步提高使得扫描成为轻而易举的事情。在强大的工程学技术基础上和多年的芯片扫描仪市场
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
无误后，从剩余产物中采用DNA产物纯化试剂盒（北京天根生化科技有限公司）回收纯化PCR产物，去除过量引物分子，用紫外分光光度计进行定量，均调整DNA浓度约为20ng/μl。1.2.2 手动芯片点样仪的使用 本试验使用V&P Scientific VP478手动芯片点样仪，包括4部分：玻片复印仪（Glass Slide Replicator）、手动玻片定位系统（Manual Glass Slide Indexing Unit）、清洗装置（Glass Slide Microarrayer Wash
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