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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
人胃粘膜细胞_GES-1
- 细胞类型:
科研细胞
- ATCC Number:
/
- 品系:
人胃粘膜细胞_GES-1
- 组织来源:
人胃粘膜细胞_GES-1
- 相关疾病:
人胃粘膜细胞_GES-1
- 物种来源:
鼠/人/其它
- 免疫类型:
人胃粘膜细胞_GES-1
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 器官来源:
人胃粘膜细胞_GES-1
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
/
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
GES-1
- 规格:
1x10^6
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ATCC货号:人胃粘膜细胞_GES-1
1. 液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?
要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
2.液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ◦C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24◦C保存。
3. 培养用液pH对细胞生长的影响
由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。
但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
4.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?
不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。
购买上海烜雅生物细胞注意事项(烜雅生物)发布
一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:
1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:
1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;
3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
四、售后服务政策
细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果;细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,我们调查核实后予免费调换,不收取任何费用。
质量可靠,售后有保障
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文献和实验心得如下: 1、 GES长的非常快,而且比较大,呈成纤维细胞样,细胞长得越好,铺的越开。 2、传代一般1:3传,每3天需要再传。 2、永生化细胞,不要等细胞100%汇合再传代,多次这样细胞容易球形增加,还不容易洗掉。 3、用胰酶(0.25%)--EDTA(0.01%)混合消化液消化好些,一般1分钟左右呈球形,即可混悬细胞了。 4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。 步骤: 吸净培养液,胰酶洗1次,倒尽,加胰酶消化液置于37度,在显微镜下注意观察,细胞变圆后,倒掉
屏障系由胃粘膜上皮细胞及其分泌的粘液层两种成分组成。即胃粘膜屏障可分为粘液屏障和粘膜细胞屏障,将胃的粘膜面做负极,将膜面做正极,就会在其间产生约30mV的电位差,称为胃粘膜PD。新的认识,认为膜电位差PD下降即是粘膜屏障受损伤的标志之一。粘膜血供因素在清除过量的H + 反扩用,维护粘膜屏障功能上,极为重要。胃泌素、前列腺素等体液调节因子,也是参与调节胃粘膜屏障功能和重要体液因素。 胃粘膜屏障可由药物等物理或化学因素而被破坏。自从发现Hp与
,病变多为多灶性或弥漫性,病变胃粘膜充血、水肿,有时并伴有点状出血或糜烂。镜下,可见炎 性病 变主要限于粘膜浅层,呈弥漫性或灶状分布。浸润的炎性细胞主要是淋巴细胞和浆细胞,有时可见少量嗜酸性粒细胞及中性粒细胞。此外可见粘膜浅层出现水肿、小出血点或表浅上皮坏死脱落。 2.慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis)本病炎症改变并不明显,主要是胃粘膜的萎缩性变化。此时胃粘膜萎缩变薄,腺体减少或消失。临床上可有胃内游离盐酸减少
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