3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(紫外分光光度法)

特别提示：包括3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(紫外分光光度法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(紫外分光光度法)
产品货号：SK116-2
产品规格：50管/48样

测定意义:
3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶，广泛存在于动植物和微生物体内，催化1，3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸，产生1分子ATP，具有影响DNA复制和修补及刺激病毒RNA合成等生物学功能，广泛应用于药物靶标设计。

测定原理：
3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP产生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH作用下产生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸，340nm处的吸光度变化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。

除了3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(紫外分光光度法),，我公司还供应以下相关产品：



名称：总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽测定试剂盒(分光光度法)
货号：SNM134
规格：50管
检测指标：总谷胱甘肽;T-GSH;氧化型谷胱甘肽;GSSG
本试剂盒可测各种动物血清（浆）、组织、全血、红细胞等样本。谷胱甘肽在机体内的广泛分布和多功能性愈来愈引起科研工作者的注意。它在许多重要的生物体现象中起着直接或间接的作用，因而涉及到许多不同的研究课 题，如酶反应机理，蛋白质和DNA等大分子的生物合成、中间代谢、辐射、肿瘤、免疫、环境毒素和老化等。特别是近年来许多研究课题都涉及到细胞对活性氧和 自由基的防御作用。其中测定生物样品中，特别是血清（浆）中还原型和氧化型谷胱甘肽（GSH和GSSG）含量变化，是机体氧化物牵累的重要指标。

优点如下：
1、快速简便：全程约40分钟，可测80例左右样本；
2、取样量微：常规操作取样量50l， 酶标仪操作仅需5l即可测样本中的ACP活力；
3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放3个月有效；
4、再现性好：变异系数CV=1.2%,20倍稀释线性仍然良好；
5、回收试验： X =96%；
6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强；
7、测试面广：可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。

名称：半乳糖检测试剂盒(荧光法)
货号：HR8714
规格：100T

名称：冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒
货号：HR8836
规格：200T
活性氧(Reactive oxygen species,ROS) 包括过氧化氢(H2O2，Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH，Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2，Singlet oxygen)、*氧化氮(NO，Nitric oxide)、超氧阴离子(•O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO• ，Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ，hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-，Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2-)。超氧阴离子遇水生成H2O2，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-，在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH·，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
冰冻切片活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针O13进行活性氧检测的试剂盒。O13是一种细胞膜通透性的荧光探针，被活性氧特异性氧化生成红色荧光物质，红色荧光强度与活性氧水平成正比，检测红色荧光就可以知道组织内活性氧的水平。
在激发波长535nm，发射波长610 nm附近，使用荧光显微镜/激光共聚焦检测红色荧光，从而测定样本内活性氧水平。我公司可以提供针对各种类型活性氧、活性氮的检测试剂盒。

储存条件：探针-20℃避光保存；清洗液2-8℃保存。
【注】：
●染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
●染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期：六个月。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
● 使用方便：可用荧光显微镜直接观察；
● 背景低，灵敏度高；
●线性范围宽，使用方便。
检测方法：
●荧光显微镜 ● 激光共聚焦显微镜
样本类型：
● 新鲜冰冻切片
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
●荧光显微镜 激发波长535 nm，发射波长610 nm。 ● 移液器 ● 冰箱 ● 冰盒
试剂：
● PBS缓冲液(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液)
●或者HBSS(With：Calciμm Magnesiμm Glucose；Without：Phenol Red。)
耗材：
● 离心管 ● 吸头

使用方法：

使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
●对于某些样本，如果荧光太强，可以按照1:200-1:1000稀释探针。探针标记的时间也可以根据情况在20-60分钟内适当进行调整。
● 以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整。
一、试剂配制
1．根据样本数，用纯水将 O13活性氧荧光探针40-100倍稀释，配成染色工作液。
2．用纯水将10×清洗液10倍稀释，配成1×清洗液工作液。
二、探针标记 1、准备待测的厚为10μm的未经固定处理的冰冻切片。
【注】:
● 必须使用新鲜组织(手术切除后1小时内)制成的冰冻切片。否则不新鲜的样本可能检测不到活性氧。
3．室温下，小心加上200μl清洗液工作液，铺满整个切片表面，静置3-5分钟。
4．小心吸除清洗液。4、滴加100μl染色工作液，在37℃培养箱避光孵育20-60分钟。
【注】:
● 最好在湿盒中孵育，避免液体蒸发。
5．移除染色液。
6．用PBS洗涤切片2-3次。
7．加盖玻片或甘油封片。
8．荧光显微镜检测。
【注】:
●染色完成后，立即进行荧光定性分析。
● 激发波长535nm，发射波长610nm。
●荧光强，表明活性氧(ROS)含量高。