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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
TransIT®-Jurkat Transfection Reagent
- 供应商:
Mirus
- 规格:
1ml
TransIT®-Jurkat Transfection Reagent
针对Jurkat和其他难转染细胞类型优化的高效DNA转染试剂
货号MIR 2120
独特配方–最大限度地提高Jurkat细胞和其他难以转染的细胞(如K562、RAW 264.7、THP-1细胞)的转染性能
高效传递–在Jurkat细胞中实现5-10%的转染效率,以确保实验成功
提供单个或多个质粒–适用于多种应用,如基因表达和启动子分析
TransIT®-Jurkat试剂实现了高转染效率。使用TransIT®-Jurkat试剂在完整培养基中转染pEGFP的Jurkat细胞24小时。
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文献和实验Invitrogen的王牌:Lipofectamine 2000转染试剂
系和要表达的蛋白。CMV启动子在大多数细胞类型中可以获得高表达活性。同其他启动子,如SV40和RSV相比,在BHK-21中其活性最高。这三种病毒启动子在T细胞来源的细胞系,如Jurkat中组成表达水平较低。转染后在培养基中加入PHA-L和PMA可以激活Jurkat细胞中CMV启动子,而单PMA就足以激活KG1和K562(人骨髓瘤白细胞)中的CMV启动子。SV40启动子的表达在含有大T抗原(存在于COS-1和COS-7)时会提高,因为大T抗原可以刺激染色体外的合成。 DNA量:高质量的DNA
后在培养基中加入PHA-L和PMA可以激活Jurkat细胞中CMV启动子,而单PMA就足以激活KG1和K562(人骨髓瘤白细胞)中的CMV启动子。SV40启动子的表达在含有大T抗原(存在于COS-1和COS-7)时会提高,因为大T抗原可以刺激染色体外的合成。 06DNA量 高质量的DNA对于进行高效的转染至关重要。转染的质粒一定纯度好、浓度高、无内毒素。浓度不要低于0.35ug/ul。产物表达,48小时mRNA表达最高;72h蛋白表达最高。 07瞬时/稳定转染表达 稳定基因表达符合长期生产需求
在实验过程中我们可能会碰到各种各样的细胞,不同的细胞培养和感染可能会有所不同,像很多细胞系的培养和感染可能会比较容易,但也有细胞比较「娇嫩」,普通的 DNA 质粒根本就转不进去,即使是病毒载体感染,也有不少难题:有些细胞的慢病毒感染能力偏弱,需要多次重复感染;有些细胞本身十分敏感且脆弱,慢病毒感染对细胞的状态影响非常大;有些细胞是悬浮细胞,进一步增大了病毒感染的难度。那么针对不同的细胞我们都有哪些培养和感染注意事项呢? 一、贴壁细胞 贴壁细胞(adherent cells),这类细胞的生长必须
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