ScaI-HF限制性内切酶

特别提示：包括ScaI-HF限制性内切酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：ScaI-HF限制性内切酶
英文名称：ScaI-HF Restriction Endonuclease
产品货号：SV0679
产品规格：5KU|5KU|1KU|500U

在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

除了ScaI-HF限制性内切酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：RNase A干粉
货号：BTN90205
规格：100mg
本产品是牛胰RNase A的冻干粉，可以配制成RNase A溶液用于各种分子生物学实验。

储存条件：低温运输，4℃或-20℃保存，有效期两年。

注意：RNase A非常容易吸附到玻璃表面，所以应避免与玻璃接触。

名称：AflIII限制性内切酶
货号：SV0024
规格：1250U|250U|125U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 50%
特性:
重组酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：TfiI限制性内切酶
货号：SV0753
规格：2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，65℃。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性:
10%。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。

名称：末端转移酶
货号：SV0949
规格：2500U|500U
特性:
催化 DNA 的 3´ 末端添加同聚物
利用修饰碱基（如 ddNTP，DIGdUTP）标记 DNA 3´ 末端
TdT 介导的 dUTP 缺口末端标记技术（细胞凋亡的原位检测）
TdT 依赖的 PCR
概述:
末端转移酶（TdT）是一种不依赖于模板的 DNA 聚合酶，催化脱氧核苷酸结合到 DNA 分子的 3´ 羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单双链 DNA 分子均可作为 TdT 的底物。此酶分子量为 58.3 kDa，无 5´ 和 3´ 核酸外切酶活性，反应中加入 Co2+ 可提高加尾效率。
来源:
重组 E. coli 菌株，含有克隆自小牛胸腺的末端转移酶基因。
浓度:
20,000 units/ml。
热失活:
75℃ 20 分钟。

名称：核酸内切酶 V
货号：SV1118
规格：1250U|250U
特性:
切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸
切割错配
概述:
核酸内切酶 V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤核苷，即脱氧腺苷的去氨基产物。核酸内切酶 V，也称为脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 内切酶，识别含脱氧次黄嘌呤核苷（无论配对与否）的双链或单链 DNA。也可识别含脱碱基（AP）位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA，但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶 V 发挥 DNA 修复功能时，还需另外一种蛋白的存在，因为它不能切除 DNA 上的脱氧次黄苷或受损碱基。
核酸内切酶 V 对错配脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 端第二个或第三个磷酸二酯键进行切割，切割第二个磷酸二酯键的效率是95%，第三个磷酸二酯键的效率是 5%，产生一个 3´ 羟基、5´ 磷酸的切刻。
来源:
重组 E. coli 菌株，携带有 Endo V 基因与编码麦芽糖结合蛋白（MBP）基因的融合基因。融合蛋白纯化后具有生物活性。该蛋白含 223 个氨基酸，分子量为 24.9 kDa。
反应条件:
1X BalbBuffer 4
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2 ，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
核酸内切酶 V 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含单脱氧次黄嘌呤核苷位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
* 脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备:合成 34 mer 寡核苷酸双链时，在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤核苷（dI）碱基。
浓度:
10,000 units/ml。

名称：β葡糖基转移酶(T4噬菌体)
货号：JN0074
规格：500U
  本品能特异性地将尿嘧啶二磷酸葡萄糖(UDP-Glc)的葡萄糖单元转移至双链DNA的5-羟甲基胞嘧啶残基上，形成β-葡糖基-5-羟甲基胞嘧啶。T4噬菌体beta葡萄糖转移酶通过克隆了T4噬菌体bgt基因的重组大肠杆菌获得。
  本品对5-hmC残基的定向修饰来区分5-mC和5-hmC。这种酶可以将所有5-hmC糖基化，产生5-ghmC。这个反应是序 列无关的，因此所有5-hmC都将糖基化，而C或5-mC则不受影响。

产品用途：
1、糖基化DNA中5-羟甲基胞嘧啶。
2、免疫检测DNA中5-羟甲基胞嘧啶。
3、通过与[3H]或[14C]-UDP-葡萄糖一起孵育将[3H]或[14C]-葡萄糖掺入到含有5-羟甲基胞嘧啶的DNA受体中，对5-羟甲基胞嘧啶残基标记。
4、通过核酸内切酶保护分析检测DNA中的5-羟甲基胞嘧啶。

基因组DNA中5-羟甲基胞嘧啶分析：

方案一
第1步：糖基化
基因组DNA用T4-BGT处理，让所有5-hmC糖基化，产生5-ghmC。这个反应是序列无关的，因此所有5-hmC都 将糖基化，未修饰或5-mC DNA则不受影响。
第2步：限制性内切酶消化
MspI和HpaII识别相同的序列（CCGG），但是对不同的甲基化状态敏感。HpaII只切割完全未修饰的位 点，胞嘧啶上的任何修饰（5-mC、5-hmC或5-ghmC）都阻碍切割。MspI则识别并切割5-mC和5-hmC，5-ghmC除外。
第3步：PCR分析
用引物扩增实验的靶DNA和对照的靶DNA。如果CpG位点含有5-羟甲基胞嘧啶，那么糖基化和消化之后检测 到条带，但是未糖基化的对照反应中没有。如果使用实时定量PCR，那么就可以估计这个位点大概有多少 羟甲基胞嘧啶。

方案二
TAB-Seq*


质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：1 单位指能够保护 0.5 μg T4 bgt-DNA 免受 MfeI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

10×反应缓冲液：50 mM Potassium Acetate，20 mM Tris- acetate，10 mM Magnesium Acetate，1 mM DTT， pH 7.9 at 25℃

贮存缓冲液：20 mM KPO4，200 mM NaCl，0.25 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.0 at 25℃

热失活：65℃，20分钟。