碘化丙啶PI染色试剂盒

特别提示：包括碘化丙啶PI染色试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：碘化丙啶PI染色试剂盒
英文名称：Cell Apoptosis Detection Kit(PI)
产品货号：KFS255
产品规格：100T

荧光标记是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来，从而区别鉴别出正常细胞、凋亡细胞、坏死细胞以及不同凋亡时期或细胞周期。

碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种DNA 结合性染料，其激发和发射波长分别为536nm 和617nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。

在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，早期凋亡细胞呈微弱红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时，凋亡细胞因内源性核酸酶被激活，使DNA 广泛降解、断裂，DNA 结构发生剧变，随着凋亡的进程，DNA 断裂产生的小分子量DNA 溢出胞外，细胞总DNA 量降低，于正常G0/G1 细胞群前出现一DNA 低染细胞群，即G1 峰前出现亚二倍体峰（sub-G1）或称A0 细胞群，即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI 直接对细胞DNA 染色后，进行流式细胞仪分析，即可检测到凋亡细胞DNA的变化。

储存：2-8℃，避光，有效期一年。

除了碘化丙啶PI染色试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：甲基绿染色液
货号：YT166
规格：100ml
本染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成绿色的染色液。甲基绿可以和细胞核中的DNA结合，从而产生细胞核染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿复染。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。

注意事项：
1. 需自备4%多聚甲*、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲*，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲*。
2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

储存条件：室温，有效期一年。

名称：*啶橙染色液
货号：HR8319
规格：100T
*啶橙(Acridine Orange，AO)为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm，吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此，在荧光显微镜下观察，*啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。*啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。*啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染，因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

储存条件：4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 请注意避光。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

使用方法：

使用注意事项：
●本染色液用于细胞染色分析，也可用于细胞涂片的检测。以下以培养细胞的荧光显微镜检测为例，
细胞染色可用预冷的70%的乙醇固定，4℃，1-2小时，也可不固定，其他方法请参阅相关资料。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●染色后请尽快检测。
●染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
● AO有毒，操作时要戴上手套。

1．收集细胞，PBS洗涤细胞一次，2000rpm离心5分钟，用PBS重悬细胞，调整细胞浓度约为106个/ml；
2．取100μl细胞悬液，加入5μl*啶橙染液，轻轻混匀；
3．混匀后4℃避光放置10-15min后，滴加于载玻片上，加盖玻片；
4．荧光显微镜检测。
5．荧光显微镜检测结果。最大激发波长为488nm。

结果分析：
在荧光显微镜下，选用488nm激发光镜检：AO染色正常细胞DNA呈均匀黄色或黄绿色。当细胞凋亡时，染色质浓缩，细胞核碎裂成点状，被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒或黄绿色碎片。