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- 2025年11月22日
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东莞汉诺
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1% w/v, 2 mL
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文献和实验荧光信号,该信号可以反映出接头5’端与模板cDNA 杂交的不同位置上的碱基信息,从而获取模板cDNA 的序列信息。 4. 分别加入能产生红黄蓝绿杂交信号的四套荧光探针,进行杂交, 每次杂交完毕用洗脱液清洗微球体阵列,除去上一轮杂交的荧光探针。用显微拍照的方法记录荧光信号,并将四种信号的图像输入计算机储存。 5. 用II 型限制性酶Bbv1 进一步消化cDNA模板,Bbv1 能在距识别位点约13 个碱基的位置切割cDNA 双链,并在cDNA 模板上产生下4 个碱基末端
DMSO配成1mmol/L溶液，等份分装后，避光冷藏。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。加入Fluo-3 AM（终浓度1～5μmol/L），37℃孵育30～60min。用PBS（含Ca2+、Mg2+）洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 可用Pluronic F-127助染。方法同上。 （五）CFDA测定细胞间通讯 1．储存液配制 CFDA即5-（6）-羧基荧光黄乙酰乙酸盐（5-(and-6)-carboxyfluorescein diacetate
连接的通讯功能。采用FRAP技术检测细胞间通讯常用荧光探针是6-carboxyfluorescein diacetate(6-羧基荧光黄乙酰乙酸盐、CFDA)，需用其酯化形式CFDA-AM。该技术可用于研究胚胎发生、生殖发育、神经生物学、肿瘤发生等过程中缝隙连接通讯的基本机制和作用。由于某些毒性物质尤其是促癌物可影响缝隙连接介导的物质运输，因此该方法也可用于鉴别对缝隙连接作用有潜在毒性的化学物质。 7． 细胞膜流动性 采用荧光光漂白恢复(FRAP)技术还可对细胞膜流动性进行研究。利用NBD-C6
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