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上海研生
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21
- 生长状态:
贴壁生长
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否
- 细胞形态:
上皮细胞
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- 英文名:
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1
- 规格:
株
细胞名称 发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1品牌
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1品牌实验要点及说明
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1品牌冷冻保存细胞之方法?
冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
CSEN/KCNIP3/DREAM 钾通道相互作用蛋白3抗体 0.2ml
RNF25 环指蛋白25抗体 0.2ml
SULT1E1/Estrogen Sulfotranferase 雌激素硫酸转移酶抗体 0.1ml
Biglycan 骨/软骨蛋白多糖1抗体 0.2ml
GNLY/NKG5 颗粒溶素抗体 0.2ml
phospho-NFKBIA(Ser32/36) 磷酸化IKB alpha(Ser32/36)抗体 0.1ml
MIP4/CCL18 巨噬细胞炎症蛋白18抗体 0.1ml
XPB/ERCC3 DNA损伤修复酶ERCC3蛋白抗体 0.2ml
Kappa-casein/CSN3 κ-酪蛋白抗体 0.2ml
WEE1 protein WEE1蛋白抗体 0.1ml
Mouse anti-Bovine IgG ascites 小鼠抗牛IgG腹水 1ml
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1品牌AGI-6780 (1 mg)N-cyclopropyl-4-(3-thienyl)-3-[[[[3-(trifluoromethyl)phenyl]amino]carbonyl]amino]-benzenesulfonamide; AGI-6780
Phosphoenolpyruvate Assay Reagent (250 ug)Phosphoenolpyruvate Assay Reagent
Chloride Standard (1 ea)Chloride Standard
D-Lactate Enzyme Mixture (1 ea)D-Lactate Enzyme Mixture
CAY10589 (10 mg)2-[[4-[([1,1’-biphenyl]-4-ylmethyl)amino]-6-chloro-2-pyrimidinyl]thio]-octanoic acid; CAY10589
4-Methyl-3-[[1-methyl-6-(3-pyridiny l)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-yl]amino]-N-[3-(t rifluoromethyl)phenyl]benzamideNVP-BHG712
AP 23573, MK-8669, RidaforolimusDeforolimus
23,27-Epoxy-3H-pyrido[2,1-c][1,4]oxaazacyclohentriacontine, AY 22989, SirolimusRapamycin
CX-4945Silmitasertib; 5-[(3-chlorophenyl)amino]-benzo[c]-2,6-naphthyridine-8-carboxylic acid
Dofetilide (5 mg)N-[4-[2-[methyl[2-[4-[(methylsulfonyl)amino]phenoxy]ethyl]amino]ethyl]phenyl]-methanesulfonamide; Tikosyn|UK 68789; Dofetilide
发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞;G1品牌培养操作步骤
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验细胞术可进行多参数分析,即同时测定一个细胞的多种性质。如散射光和荧光,或多种不同颜色的荧光。例如细胞经吖啶橙染色后,DNA 发绿色荧光,RNA 发红色荧光。测定这两种荧光就能同时得知一个细胞内的 DNA 和 RNA 含量。测定结果可用二维散点图或三维立体图表示。用这种方法可根据 DNA 和 RNA 含量而鉴别出 G0 与 G1、M 期和 G2 期细胞。用流式细胞术与液体闪烁技术相配合,还可求得细胞通过 G1、S 和 G2+M 期的时间 (T、Ts、T+M 及其变异系数。近年利用抗溴脱氧
【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体?
(苯丙氨酸),Thr(苏氨酸)取代了GFP上的Ser65(丝氨酸),与GFP相比,具有更强更稳定的绿色荧光。CFP(Cyan Fluorescent Protein)与此类似,也是GFP第66位上的酪氨酸Tyr被色氨酸(Thr)所取代的结果,发蓝色荧光。由此可见,GFP标签与其它突变体GFP、YFP、EYFP、CFP的序列非常的类似,只有1-2个氨基酸残基的变化。EarthOx GFP标签抗体(#E022030)用于IF实验 EarthOx GFP标签抗体(#E022030)用于WB实验,1道为阴性
Hela 细胞 DNA 含量分布曲线上,第一个峰是含有 2 C DNA 含量的 G1/G0(DNA 合成前期/静止期)细胞, 其次一个峰是 4 C DNA 含量的 G2 + M(DNA 合成后期+有丝分裂期)细胞,从 2 C~4 C 间的区域为 S 期(DNA 合成期)细胞。采用绘图法或计算机拟合法可计算出细胞周期各时相细胞占整个细胞群体的百分数。 用流式细胞术可进行多参数分析,即同时测定一个细胞的多种性质。如散射光和荧光,或多种不同颜色的荧光。例如细胞经吖啶橙染色后,DNA 发绿色荧光,RNA
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