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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 检测范围:
详询
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
牛
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
- 规格:
48T/96T
牛Y一谷氨酞转肤酶(γ-GTP)ELISA试剂盒说明书可直接向我司客服索取 ★★★★★欢迎新老顾客前来选购咨询。
英文名称:Y一glutamyl transpeptidase
价 格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
样本处理方法
组织匀浆原则:
1,对于样本要求保持鲜重
2,称取样本中的重量不小于50mg,一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。
3,匀浆的比例选取10%,相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆。
4,匀浆液选取PBS(PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)
5,匀浆过程选用组织匀浆器,冰浴上匀浆。(或者进行液氮碾磨)
6,离心取上清,离心转速选用5000转每分,时间是15分钟。取上清液待检!
样本需求量:
植物是组织样本,固体 要求的重量是大于50mg。血清血浆50微升以上,一个样本。对大鼠小鼠液体样本需求可以适当放宽,但必须大于10微升以上
1,样本在保持鲜重的同时,重量不能低于50mg
2,组织匀浆比例按照10%进行,相当于1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液要求用PBS,浓度是0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4我们并不要求没个样本的重量必须保持1g整数,只要大于50mg即可,相对应匀浆液按照1:9的关系随之改变即可
3,剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的匀浆液的量
4,离心取上清
备注:换算结果是乘以加入匀浆液的量,除以称取的重量,这个最终换算比例相当于乘以9g除以1ml,如果检测细胞内部,需要加一个超声破碎过程!
组织匀浆三原则
剪碎叶片组织放入碾钵,然后液氮碾磨成粉末,加入换算后的均浆液的量。这个不会处理的话,可以直接邮寄叶片我们处理。
中文名称:牛Y一谷氨酞转肤酶(γ-GTP)ELISA试剂盒
规 格:48T/96T
方 法:ELISA
物 种:牛
血清血浆的收集
首先要求确定样本收集类型,血清还是血浆?一般情况收集血清为好,血清收集2种方法,如下:
- 促凝管(临床上用橘红色管头)待分层后取上清液保存
- 自然凝固,取普通生化试管,自然凝固30分钟以上,然后离心取上清,离心转速为2000转每分,时间15分钟。
其次涉及样本保存,因为不确定老师样本取样周期和实验周期到底有多长,这个过程涉及以下问题。
- 如果取样周期比较久,而且每次样本不是很多,每天或者短时间都有样本出来,这个情况样本涉及到保存。保存条件是1周内实验的,2-8℃,一周以上一个月以内实验,-20℃保存,一月以上-80℃保存。
- 关于样本检测问题,如果样本取样周期过程,涉及到分不同时间段来检测,那么试剂盒的批次也会出现差异,会有一定的变异系数。这个过程有2个建议,第一,可以收集一定数量(满足一个试剂盒的量或者几个试剂盒的量)来进行一次实验。避免样本长时间保存(样本保存时间越长,蛋白降解风险越大),但缺点是会用到不同批次试剂盒,影响批间差。第二个就是把样本全部收集好了后,再一次进行实验,用同一批次试剂盒。这个可以减少批间差,但样本不同时间取样会导致前后样本数值之间会存在一定的差异性。这个还是要根据实际取样周期和取样量来做决定。
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
★★★★★希望这些样本处理的方法可以帮到您★★★★★
质量可靠,售后有保障
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文献和实验。3、ELISA的试剂在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。前文(2.2)已述,ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);(5)酶联物(结合物)及标本的稀释液;(6)洗涤液;(7)酶反应终止液。3.1 免疫吸附剂已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2~8℃)干燥的条件
阿兰梦 看了文献测活性RhoA 有几种方法: 1、经典的,是放射标记γ32-P-GTP 方法,因为放射性,现在不怎么用了。 2、看到国内有文献,采用分离胞膜胞浆,然后用抗RhoA抗体做western。这是基于胞浆都是GDP-RhoA,胞膜是GTP-RhoA的原理,但是总觉得有什么不对的地方?为什么没有被广泛采用? 3、现在多采用 pull down方法,RhoA-GTP与Rhotekin的RBD结合,最后
BSA的PBS等。 【操作步骤】 (1)用125 I标记抗体。通过Sephadex G-75分子筛分离标志抗体,将125 I-抗体溶于含1%BSA的PBS中,γ计数仪测定计数,即(T)值; (2)准备5×106 细胞,用含1%BSA的PBS将细胞进行系列倍比稀释,各管加125 I-抗体(终浓度13ng/ml),37℃温育2h。用PBS洗各管细胞3min,8000r/min离心15s,弃上清,反复3~5次。用γ计数仪对各管测定,即(B)值。绘图,利用横座标为0,计算出r值
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