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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 保质期：
6个月
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
RT
- 规格：
500ml
产品简介：
原位核酸分子杂交组织(或细胞)化学技术简称原位杂交。其基本原理是两条核苷酸单链片段在适宜的条件下通过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双链分子的特点，把带有标记的(有放射性核素，如3H、35S、32P及荧光素、生物素等非放射性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内待测核酸（RNA或DNA）片段进行杂交，然后可用放射自显影等方法予以显示在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位。
做核酸杂交后，需要洗脱，一般漂洗液的主要成分为SSC缓冲液。Leagene核酸杂交漂洗液(低张力)由高浓度SSC缓冲液、Trixton等组成，离子强度较低，常用于杂交后的第二次洗脱。
核酸杂交漂洗液(高张力)
操作步骤(仅供参考)：
1、 在脱水后的玻片上滴加100～120μl核酸预杂交液，置于放有湿盒液的湿盒中，55～58℃下预杂交2h。
2、 用52℃预热的核酸杂交漂洗液(高张力)漂洗2次，每次30min。
3、 用52℃预热的核酸杂交漂洗液(等张力)漂洗2次，每次30min。
4、 用52℃预热的核酸杂交漂洗液(低张力)漂洗2次，每次30min。
5、 检测杂交信号。
核酸杂交漂洗液(高张力)注意事项:
本品使用前切忌核酸污染。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验核酸杂交技术基本上是Hall等1961年的工作开始的，探针与靶序列在溶液中杂交，通过平衡密度梯度离心分离杂交体。该法很慢、费力且不精确，但它开拓了核酸杂交技术的研究。Bolton等1962年设计了第一种简单的固相杂交方法，称为DNA-琼脂技术。变性DNA固定在琼脂中，DNA不能复性，但能与其它互补核酸序列杂交。典型的反应是用放射性标记的短DAN或RNA分子与胶中DNA杂交过夜，然后将胶置于柱中进行漂洗，去除游离探针，在高温、低盐条件下将结合的探针洗脱，洗脱液的放射性与结合
一、基本原理 是指运用寡核苷酸等探针检测细胞和组织的RNA表达的一种原位杂交技术。其基本原理是：在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知RNA核苷酸片段，近核酸杂交中碱基配对原则，与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合（杂交），所形成的杂交体经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的Mrna、rRNA 和tRNA分子。 RNA原位杂交不同于DNA原位杂交主要有： （1）使用的探针不同：RNA原位杂交中多采用RNA或寡核苷酸探针，特异性更强
一、地高辛（Dig）标记DNA探针在石蜡切片上的检测方法 1. 组织切片的预处理 （1）固定：组织以10%中性福尔马林液，常规石蜡包埋，切片厚4-6 μm，最好用硅化玻，60℃烤片6-8 h。 （2）脱蜡至酒精。 （3）入0.2 mmol/L HCl 20 min 去除蛋白。 （4）50℃2×SSC，含5 mmol/L EDTA溶液中30 min。 （5）蛋白酶K（1 μg/ml 溶于0.1 mol/L PBS中），37℃20-25 min。 （6）0.2
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