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- 2025年12月05日
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上海复祥生物提供 ATCC 细胞|细胞系|细胞株|肿瘤细胞|细胞|贴壁细胞|悬浮细胞|,细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和最优培养条件,网站上有细胞照片,欢迎各位老师来电咨询!联系电话400-821-8510 手机15000266580
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文献和实验littleyan0418 我现在的任务是要构建人肺癌细胞的cDNA文库，但我不是这个方面科班出身，好多地方还不是很明白，想请教师兄师姐的经验，应该注意些什么。现在对总RNA的提取我有点找不出头绪。麻烦师兄师姐们可以给我分享些这方面的资料和网址吗？非常感谢！！ neuronboy http://www.takara.com.cn/ 价格、试剂盒和说明书都有。呵呵 littleyan0418
我培养过不少肺癌细胞（人类），其中绝大部分都是贴壁细胞，具体如： （１） Ａ５４９（肺腺癌） （２） ＮＣＩＨ４４６（小肺细胞癌） （３） ８０１（非小肺细胞癌） （４） ＮＣＩＨ４６０ （大细胞肺癌） 在消化传代过程中，步骤基本一致： 吸去旧的培养液－＞用Ｈａｎｋｓ＇（１Ｘ）清洗一两次－＞加入一定量的消化液（Ｔｒｐｓｉｎ－ＥＤＴＡ）－＞置显微镜下观察，待细胞大部分变圆时，回到超静台－＞吸去消化液－＞加入一定量的新培养液－＞反复吹打细胞－＞再置显微镜下观察，直到细胞全部悬浮起来－＞
所需的D-HANK'S液和胰酶和用1640配置的适当浓度小牛血清最好都放在37度预热十分钟左右，让它们和细胞生长环境的温度是一样的。这样能达到既对细胞没有外来刺激的作用又能达到反应的最佳条件。我用的是小培养瓶，方法是:先把旧的培养液倒掉，用D-HANK'S大约3ml洗一次，加浓度为0.1%的胰酶进行消化，添加量只要能均匀的覆盖培养瓶底，大约要1.5ml，最好把瓶盖旋紧放到37度培养箱里培养3-5分钟，在显微镜下观察细胞收缩，变圆，加入3ml的10%的血清终止消化。小心仔细的吹打培养瓶底使细胞
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