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-20℃&-80℃
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3个月~12个月
- 英文名:
pLVX-Puro质粒
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41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验但感觉自己包装效率还是不太高,做起来不好弄 kinguangjun 你可以考虑clontech的pLVX-ShRNA2和pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒系统,比invitrogen的慢病毒系统要高两个数量级以上,我们实验室一直都用这个系统。 jinanfendou 看你做什么实验了,慢病毒载体系统很多公司有卖的,但是你自己包装的话,滴度可能达不到这么高,好转染的细胞还是可以的,但是要是难转染的细胞和动物
作为细胞生物学专业的博士生,在基因功能研究上已经有五年的经验了,今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计,慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点,为了避免移码突变,上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel,下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法,首先设计引物将目的基因 PCR 出来,即酶切位点加基因引物,此时应注意,为了防止酶切将基因破坏,通常习惯在两端
依赖于其完整序列和定位,cDNA 过表达常常无法重现其天然功能。 5. 需要做 rescue 实验、回补被敲除的基因 用过表达质粒(且要对 cDNA 做同义突变以抵抗原有的 gRNA)。CRISPRa 无法用于已敲除基因的回补——基因组位点已经被破坏了。 --- 四、吉凯基因CRISPR相关产品与服务 CRISPR/Cas9慢病毒产品 提供 sgRNA 与 Cas9 慢病毒包装。CRISPRa 项目中,dCas9 融合蛋白与 modified sgRNA 通常需要慢病毒稳定递送,病毒滴度和表达稳定
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