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3个月~12个月
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pLVX-Puro质粒
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41
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上海禾午生物科技有限公司
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2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验但感觉自己包装效率还是不太高,做起来不好弄 kinguangjun 你可以考虑clontech的pLVX-ShRNA2和pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒系统,比invitrogen的慢病毒系统要高两个数量级以上,我们实验室一直都用这个系统。 jinanfendou 看你做什么实验了,慢病毒载体系统很多公司有卖的,但是你自己包装的话,滴度可能达不到这么高,好转染的细胞还是可以的,但是要是难转染的细胞和动物
作为细胞生物学专业的博士生,在基因功能研究上已经有五年的经验了,今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计,慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点,为了避免移码突变,上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel,下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法,首先设计引物将目的基因 PCR 出来,即酶切位点加基因引物,此时应注意,为了防止酶切将基因破坏,通常习惯在两端
Cell Death Differ:中大五院黄曦团队发现新冠病毒引起肺损伤的分子机制
上皮细胞线粒体凋亡,并导致肺水肿的发生。 图片来源:Cell death & differentiation 病毒相关蛋白与细胞蛋白相互作用影响细胞凋亡过程。作者首先分别将携带刺突蛋白(Spike protein, S 蛋白),核衣壳蛋白(Nucleocapsid, N 蛋白),膜蛋白(Membrane protein, M 蛋白)和包膜蛋白(Envelope protein,E 蛋白)真核表达质粒载体分别转染人肺上皮 H292 细胞和人血管内皮 EA.hy926 细胞,通过荧光分光光度法检测胞内活化
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