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12个月
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上海晶抗生物工程有限公司
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低温避光
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500ml
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文献和实验(Wright’s)染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。 试剂与器材 试剂: 染色液的配制: 1. 姬姆萨(Giemsa)染液的配制 (1)原液配制 Giemsa 粉剂 0.8 g 甘油(医用) 50 ml 甲醇 50 ml 将Giemsa粉剂溶于甲醇中,在乳钵中充分研磨,溶解后再加甘油,混合均匀,置于37~40℃温箱内8~12h,过滤,装入棕色试剂瓶内,密封保存备用。 (2)稀释液 临用时取Giemsa原液5ml,加磷酸盐缓冲液(pH6.4~6.8)50 ml
氢二钾0.87 g,加水使溶解成1000 ml,即得。 磷酸盐缓冲液(PH6.5) 磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2 ml,用水稀释至100 ml,即得。 磷酸盐缓冲液(PH6.6) 取磷酸二氢钠1.74 g、磷酸氢二钠2.7 g与氯化钠1.7 g,加水使溶解成400 ml,即得。 磷酸盐缓冲液(含胰酶)(PH6.8) 取磷酸二氢钾6.8 g,加水500 ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节PH值至6.8; 另取胰酶10 g,加水适量溶解,将两液混合
的阳性信号 *样本带自发荧光需要设置三管单阳对照,确保每一管都只有一种荧光 实验组:检测实验结果。 Tips: 样本为贴壁细胞: *细胞培养基中漂浮的细胞需要收集,与后续收集的贴壁细胞一起检测 *避免人为操作带来的细胞损伤,如:胰酶消化时间要适宜,消化贴壁细胞时操作要轻柔等 *尽量不使用含EDTA的胰酶,因为EDTA会影响Annexin V与PS的结合。如果一定要用含EDTA的胰酶,终止消化后要将细胞洗涤干净,尽量去除EDTA *细胞比较难消化时可以分批次进行消化,避免先消化下来的细胞被过度消化导致
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