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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
B类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
23
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
圆形细胞聚集成葡萄状
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1
- 规格:
株
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了,科研工作者又该忙碌了,大家可能都在寻找适合自己的细胞,不用急,我们帮您掌舵,让您满意!
传代方法:细胞完全汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌产品基本信息:
细胞名称 人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌
形态特性 圆形细胞聚集成葡萄状
生长特性 贴壁生长
特征特性 WERI-Rb-I细胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的两株人眼癌细胞系中的一株。 细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 扫描电镜显示在表面囊泡,板状伪足和微绒毛在数量上和频率上的改变。 细胞分化研究,肿瘤治疗的动物模型和生化评价都涉及这株细胞。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:
2。3天内可长满。
传代情况
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
以下是人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌的相关产品:
小鼠 NDUFB11 基因全长ORF克隆
大鼠 ANKRD46 基因全长ORF克隆
小鼠 FADD 基因全长ORF克隆
大鼠 CDH16 基因全长ORF克隆
大鼠 ACSM1 基因全长ORF克隆
人 HSPA8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
大鼠 IL20 基因全长ORF克隆
人 SDC1 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签
人 TNFα 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 ADAMTS5 基因全长ORF克隆
Mouse GFAP Gene cDNA Clone (full-length ORF Clone)
人 IL12A / NKSF1 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌Phenformin (hydrochloride) (100 g)N-(2-phenylethyl)-imidodicarbonimidic diamide, monohydrochloride; Phenformin (hydrochloride)
COX-FIS Potassium Hydroxide (1 ea)Potassium Hydroxide; COX-FIS Potassium Hydroxide
Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Strip Plate (5 ea)Precoated (Mouse Anti-Rabbit IgG) EIA 96-Well Strip Plate
20-HETE-d6 (100 ug)20-hydroxy-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-16,16,17,17,18,18-d6 acid; 20-hydroxy Arachidonic Acid-d6; 20-HETE-d6
13,14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin F1α (100 ug)9α,11α-dihydroxy-15-oxo-2,3,4,5-tetranor prostanoic acid; 13,14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin F1α
SupeImmunoHistoMountSupeImmunoHistoMount
CHIR1244-[(3S)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-ylamino]-3-(1H-benzimidazol-2-yl)-6-chloro-2(1H)-quinolinone
L-138,037 (10 mg)N-[[4-(diethylamino)phenyl]methylene]-4-(diphenylmethyl)-1-pipeazinamine
Palmitic Acid-d31 (1 g)hexadecanoic-2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,16-d31 acid
Geranylgeranyl Pyrophosphate (ammonium salt) (1 mg)P-[(2E,6E,10E)-3,7,11,15-tetramethyl-2,6,10,14-hexadecatetraen-1-yl] ester-diphosphoric acid, triammonium salt; GGPP; Geranylgeranyl Pyrophosphate (ammonium salt)
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文献和实验与原癌基因编码的蛋白质促进细胞生长相反,在正常情况下存在于细胞内的另一类基因——肿瘤抑制基因的产物能抑制细胞的生长。若其功能丧失则可能促进细胞的肿瘤性转化。由此看来,肿瘤的发生可能是癌基因的激活与肿瘤抑制基因的失活共同作用的结果。目前了解最多的两种肿瘤抑制基因是Rb基因和P53基因。它们的产物都是以转录调节因子的方式控制细胞生长的核蛋白。其它肿瘤抑制基因还有神经纤维瘤病-1基因、结肠腺瘤性息肉基因、结肠癌丢失基因和Wilms瘤-1等。 Rb基因随着对一种少见的儿童肿瘤——视网膜母细胞瘤
RB基因即成视网膜细胞瘤基因,为视网膜母细胞瘤易感基因,是世界上第一个被克隆和完成全序列测定的抑癌基因。RB基因转录产物约4.7kb,表达产物为928个氨基酸组成的蛋白质,分子量约105kDa,称为P105-Rb。Rb蛋白分布于核内,是一类DNA结合蛋白。Rb蛋白的磷酸化/去磷酸化是其调节细胞生长分化的主要形式,在细胞周期的G。、G1期,它表现为去磷酸化,在G。、S、M期则处于磷酸化状态。
抗癌基因 也称为肿瘤抑制物。现在共发现了 10 种抗癌基因,其中研究得较为深入的是人的 Rb(Retinoblastoma 视网膜母细胞瘤 ) 和 p53 蛋白。 Kundson 早在 1971 年根据对遗传性和散发性视网膜母细胞瘤患者的调查研究,提出著名的“二次突变假设( two mutation hypothsis )”。认为视网膜母细胞变成瘤细胞必须要经过二次突变。第一次突变存在或发生于上一代的生殖细胞中,则患儿的体细胞已有了一次遗传下来的突变
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