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4°C
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多克隆
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Biotinylated
- 抗体英文名:
Jacalin
- 抗体名:
Jacalin
- 规格:
5 mg
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文献和实验生物素标记凝集素的组织化学染色程序生物素(biotin)与亲和素(avidin)具有非常高的亲和性。1分子亲和素可与4分子生物素结合。故可利用这一特点,先将生物素与辣根过氧化物酶(HRP)结合,再制备辣根过氧化物酶标记的亲和素―生物素复合物(avidin-biotin-peroxide complex,ABC),该复合物可含数个辣根过氧化物酶分子。又因复合物中的亲和素未被饱和,除与辣根过氧化物酶―生物素结合外,尚有一定的位点可与其他生物素结合。因此,实验中可通过生化反应将凝集素结合在另外的生物素
按以下步骤进行免疫染色: 1. 含1%正常血清或1%BSA的PBS预孵育20~30分钟; 2. 两种特异性第一抗体(免疫自不同种属动物)的混合物4℃下孵育24~48小时;PBS漂洗3次,每次10分钟; 3. 与第一抗体种属相应的纳米金标记的IgGFab,片段和生物素标记的第二抗体的混合物室温孵育2小时或4℃下孵育12小时后PBS漂洗3次,每次10分钟; 4. ABC(1:100,Vector)室温孵育2小时后PBS漂洗3次,每次10分钟。之后PBS漂洗2次,每次10分钟
领域奠基之作:Cell 重磅报道可胞外展示的糖基化修饰 RNA——glycoRNA
细胞表面,研究人员结合过氧化物酶催化近距离标记技术,利用凝集素作为细胞表面亲和力工具结合活细胞,然后招募过氧化物酶并将生物素 - 苯胺沉积在 glycoRNA 上。检测 RNA 发现 MAAⅡ(唾液酸)或 WGA(N - 多糖)染色时产生高分子量条带,而 ConA(甘露糖)染色没有。并且信号是 RNase 敏感的,在用唾液酸酯酶处理 RNA 时,生物素信号进入凝胶孔出现定量的变化,但信号量没有减少,表明多糖特别是唾液酸有助于 glycoRNA 的异常迁移。在细胞裂解液上重复,MAAⅡ 和 WGA 仍标记
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