DiI标记人源乙酰化低密度脂蛋白(红色荧光)

特别提示：包括DiI标记人源乙酰化低密度脂蛋白(红色荧光)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：DiI标记人源乙酰化低密度脂蛋白(红色荧光)
英文名称：Human Dil-Acetylated Low Density Lipoprotein(Human DiI-Ac-LDL)
产品货号：SY0440
产品规格：500μg

本品为红色荧光标记的乙酰化人源低密度脂蛋白（Human DiI-Ac-LDL），是标记荧光探针DiI（1,1-dioctadecyl-3,3,3,3- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）的Ac-LDL。当DiI-Ac-LDL标记细胞后，在溶酶体酶的作用下，脂蛋白被降解，而DiI在细胞内膜聚集，从而可以用来检测修饰型LDL的吸收情况。可以用来标记血管内皮细胞、巨噬细胞和内皮祖细胞（EPC），可用来鉴定并分选这些细胞，以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用。我司提供的DiI-Ac-LDL，每个批次均经过牛大动脉内皮细胞和小鼠巨噬细胞的标记检测来评估产品的标记特异性，从而保证结果的一致性。

LDL是由极低密度脂蛋白（VLDL）转变而来，主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，运输到肝脏合成胆酸，其可用于研究受体介导的内吞作用过程，尤其是在动脉粥样硬化等疾病中，其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。

乙酰化的LDL是修饰LDL中的一类，LDL含有未修饰的载脂蛋白，可以用来研究正常胆固醇的转运和内吞作用。当LDL载脂蛋白的赖氨酸残基被乙酰化修饰后，LDL复合物不再与LDL受体结合，但是，修饰型LDL更容易与内皮细胞和小胶质神经细胞的“scavenger”受体结合。因此，Ac-LDL可用来研究上述细胞的功能。

人源乙酰化低密度脂蛋白（Human Acetylated Low Density Lipoprotein, Human Ac-LDL），来自健康人源血浆LDL，Hepatitis C，HIV-I和HIV-II抗体检测均为阴性。

我司提供的Human DiI-Ac-LDL为无菌包装，可以直接稀释使用。除提供DiI-Ac-LDL，我们还提供不带标记的Ac-LDL，Ox-LDL（氧化修饰）以及不经修饰的LDL等。

浓度：0.8-3.0 mg/ml
外观：乳状液体
缓冲液组分（Buffer Components）：0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4
储存条件：4℃，无菌避光，有效期6周

除了DiI标记人源乙酰化低密度脂蛋白(红色荧光),，我公司还供应以下相关产品：



名称：组织培养专用蛋白酶抑制剂
货号：BTN130531
规格：1mL
本产品就是混合各种蛋白酶抑制剂而得的200×浓缩液，溶剂为DMSO。组织培养时，各种分泌蛋白会不同程度的被各种外源和内源性蛋白酶降解。为防止分泌蛋白的降解，需要在培养基中添加各种蛋白酶抑制剂。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广，由多种蛋白酶抑制剂组成，能特异性抑制丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天门冬氨酸蛋白酶及氨基肽酶等各种蛋白酶活性。
3. 它可以与各种组织培养基兼容，在培养基中加入1/200体积即可。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期两年。

名称：DAPI染色液
货号：SNM472
规格：50ml

名称：即用型免疫组织化学SP试剂盒(Mouse)
货号：KFS030
规格：60 片
适用于免疫组化方法的石蜡包埋、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本。

注意事项：
1.检测标本时需同时做阴性对照和阳性对照。
2.DAB 是一潜在致癌物，使用时请注意自我防护。
3.DAB 显色液需现用现配，避光放置，且在30 分钟内染色。
4.用滴瓶加液时，每一滴的体积为50μL。

名称：AMCA标记抗兔免疫荧光染色试剂盒
货号：KFS039
规格：300T
适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时，就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。含有AMCA标记的山羊抗兔IgG(H+L)抗体，可以用于检测兔来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的蓝色。

AMCA（Ex/Em：350nm/450nm）是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。AMCA的荧光光谱与DAPI和Hoechst比较接近。

本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。

本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。

本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
4. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
5. 需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂，需自备盖玻片和载玻片。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存：2-8℃，避光，有效期6个月。

名称：Western通用蛋白Marker
货号：JN0174
规格：50μl
  本品由四种非预染的蛋白质混合组成，不管WB时采用何种形式的一抗或二抗，都能够跟目标蛋白一起显色。显色方式只与抗体的标记有关，因此适用于任何种属来源的抗体和任何显色方式。

产品特点：
1、在X光片上与目标蛋白一起显色，可直接判断目的蛋白质分子量大小；
2、没有标记或偶联其他分子，BalbWB Marker显示更准确的分子量；
3、可同时用作阳性对照，用于判断抗体的效果。


图例一：western blot电泳图 。
一抗小鼠抗His(1:2000)，二抗山羊抗小鼠HRP(1:5000)。
Lane 1：上样量80ng
Lane 2：上样量40ng


名称：植物根茎蛋白提取试剂盒
货号：HR0057
规格：50T/100T
植物根茎蛋白提取试剂盒提供全套试剂，用于从各种根茎组织样品中提取总蛋白。适用于各种地下茎、地上茎、匍匐茎、鳞茎、变态茎、以及各种肉质根、气根等样本。
本试剂盒不适用淀粉含量高的块根/块茎类样品的蛋白提取，如马铃薯、芋头等。高淀粉含量的样品请选用我公司其他产品号的试剂盒(相关产品HR8040)。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份，释放出可溶性蛋白质。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白，下游应用范围广，提取液裂解细胞的能力较温和，需要根据实际样本情况优化裂解时间。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用我公司其他货号的试剂盒。也可以将最后样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理(相关产品HR0389)。
我公司可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、液体、土壤等不同样本的蛋白提取试剂盒，包含用于非双向电泳和双向电泳等不同下游应用的试剂盒以及含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒，专用于蛋白质谱检测的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒可供选择。我公司还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体等不同细胞器的提取试剂盒。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
【注】：
●蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
●蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
1．正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3．禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4．样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5．最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6．实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
1．使用方便，提取蛋白不需经过反复冻融、超声破碎等前处理。
2．提取过程简单方便，将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．总蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。
6．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
●离心机● 振荡器● 涡旋混匀器● 移液器●冰箱●冰盒
试剂：
● PBS (pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1×))(phosphate buffer saline/Dμlbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材：
●离心管● 吸头

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
●蛋白酶抑制剂在2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
● 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
● 下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。

1．提取液准备：
每500μl冷的提取液A中加入2μl蛋白酶抑制剂，充分混匀后置冰上备用。
【注】：
● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2．取洗净擦干后的300-500mg 鲜嫩植物组织样本，加入500μl提取液A 后用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
【注】：
● 也可置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入500μl冷的提取液A。
● 没有液氮研磨条件，也可加入500μl提取液A 直接置冰上研磨。
3．将匀浆液吸入一个预冷的干净离心管中在4℃振荡30分钟-1小时。
【注】：
● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
● 没有振荡条件也可不振荡，静置1小时，中间每隔10分钟用移液器吹打混匀一次。
●有些黏液较多的样本可能难以吸取，可以将吸头剪掉一点再吸。
4.在4℃，12000g条件下离心10-15分钟。
5．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。
6．上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】：
● 建议用BCA 法进行蛋白定量。相关产品：HR0329。
●蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
●有些植物组织样本的蛋白质含量较低，在条件允许的情况下，可以加大组织样品的上样量。
● 同一种植物的不同年龄样本的蛋白质含量差异较大，条件允许情况下，应尽可能选用年龄小的样本。
●蛋白质浓度低不利于下游实验应用时，可以对样品进行浓缩。相关产品：HR0388。
常见问题分析：
●细胞裂解速度慢？
为了充分保证提取得到的蛋白的活性，提取液采用独特的保护蛋白的配方，裂解能力温和，下游应用范围广。
●蛋白浓度低？
有些植物组织样本的蛋白质含量较低，在条件允许的情况下，可以加大组织样品的上样量。
处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白？
建议用BCA 法。不适合用Bradford 法，因为试剂A中含有干扰Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford 法定量。
● 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。