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- 百奥莱博
- SYA776-SMZ
- 北京
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
382
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
48次/盒
特别提示：包括兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：兔源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
产品货号：SYA776
产品规格：48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对兔源性成分特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR技术对兔源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中兔源性成分的探针报告基团为FAM。
二、用途
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中兔源性成分的检测。
三、试剂盒组成(48T)
组成成分 数量 规格
兔物种荧光qPCR反应液(Rabbit-qPCR MIX) 1管 720μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Rabbit-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Bio-Rad系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL兔物种荧光qPCR反应液(Rabbit-qPCR MIX)，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Rabbit-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明兔源性成分核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明兔源性成分核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行兔源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明兔源性成分核酸阳性；否则判为样本阴性。
九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验。生长势较弱，叶色深绿、叶面有皱。果实圆筒、倒卵圆或椭圆形等，果同光滑、皮薄，肉厚1-2cm，脆嫩多汗式或面而少汁可溶性固形物含量8-12%。皮瓤均可食用。单要重多在0.5kg以下，不耐贮运。种子中等或小。较耐高湿。在日照较少，温差较小的环境也能正常生长。中国广泛栽培，东北、华北是主产区。日本、朝鲜、印度及东南亚等国也有栽培。 生长发育与果实形成：甜瓜的生长发育过程可分为发芽期、幼苗期、伸蔓期和结果期。 发芽期：播种至子叶展平第一真叶显露，约需10天，这一时期生长量小。发芽
。2、中药活性成分的提取。植物药有效成分往往被包在细胞壁以内，用纤维素酶可以破坏细胞壁的纤维素，提高有效成分的提取率。3、纤维素酶的作用机制。根据酶的作用方式纤维素酶分为C1酶、CＸ酶和纤维二糖酶等类型。C1酶主要作用于天然纤维素，使之转变为非结晶的纤维素。CＸ酶又分为CＸ1酶和CＸ2酶两种。CＸ1酶是一种内断型纤维素酶，它从水合非结晶纤维素分子内部作用于β-（1，4)糖苷键，生成纤维糊精与纤维二糖。CＸ2酶是一种外断型纤维素酶，它从水合性纤维素分子的非还原端作用于β-（1，4)糖背键，逐步切断β
以做为复制的模板. 而Annealing 则是令 Primers于一定的温度下附着于模板DNA两端。 最后在DNA聚合酶 (e.g. Taq-polymerase) 的作用下进行引物的延长 (Extension of primers)及另一股的合成。PCR的历史 PCR的发展可以说是从DNA合成酵素的发现缘起。DNA合成酵素最早于1955年发现 (DNA polymeraseI)， 而较具有实验价值及可得性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H
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