WEHI 22.1(B淋巴细胞 ) 带证书

WEHI 22.1(B淋巴细胞 ) 带证书

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  • ¥600 - 2000
  • ATCC
  • XY-XB-1186
  • 中国/美国
  • 2025年07月10日
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      100

    • 细胞类型

      科研

    • 品系

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    • 组织来源

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    • 物种来源

      鼠/人/其它

    • 细胞形态

      上皮样/成纤维样/其它

    • 器官来源

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    • 运输方式

      常温运输/干冰运输

    • 年限

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    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 英文名

      WEHI 22.1

    WEHI 22.1(B淋巴细胞 ) 带证书详细信息
    传授WEHI 22.1(B淋巴细胞 ) 带证书细胞培养                                
     细胞培养基本方法
    细胞复苏步骤

    一、所需仪器:
    离心机
    生物安全柜
    电动移液器
    CO2培养箱
    倒置显微镜
    液氮罐
    恒温水浴锅

    二、所需试剂:
    胎牛血清(FBS
    无菌1×PBS pH=7.2
    完全培养基

    三、所需耗材:
    离心管(15ml50ml
    T-25细胞培养瓶
    一次性无菌移液管(2ml5ml10ml


    四、操作步骤:
    1. 将恒温水浴锅中的水预热到37℃
    2. 从液氮罐中取出要复苏的细胞,尽快转入恒温水浴锅中复温,工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率;
    3. 将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中,充分混匀后,300g离心5min
    离心完成后弃去上清,用1ml完全培养基重悬细胞后,转入T-25细胞培养中,再加完全培养基4ml,之后转入CO2培养箱中培养静置。 
    细胞冻存步骤
    一、所需仪器:
    -86℃超低温冰箱
    离心机
    生物安全柜
    电动移液器
    CO2培养箱
    倒置显微镜
    液氮罐

    二、所需试剂:
    胎牛血清(FBS
    细胞培养级DMSO
    冻存液:80%FBS+20%DMSO
    无菌1×PBS pH=7.2
    消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA
    isopropanol
    三、所需耗材:
    离心管(15ml50ml
    T-25细胞培养瓶
    一次性无菌移液管(2ml5ml10ml
    1.8ml冻存管
    程序降温盒

    四、操作步骤:
    1. 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,吸弃瓶内的培养基;
    2. 向培养内加入无菌1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃PBS
    3. 重复步骤2一次,之后向瓶内加入消化液1ml,轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min
    4. 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,如还有部分细胞为消化下来,可在生物安全柜内用移液管吸起消化液,吹打培养平面;
    5. 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化,然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中,300g离心5min
    6. 离心完成后,弃上清,用0.5mlFBS重悬细胞,再加入0.5ml冻存液,用移液管充分混匀,之后转入1.8ml冻存管中;
    7. 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
    8.第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。
    WEHI 22.1(B淋巴细胞 ) 带证书


                          ★★★★★希望这些培养的方法可以帮到您★★★★★
     

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         冻存细胞时间为5-7个工作日,活细胞为7-15个工作日。

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