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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称DAPI dihydrochloride,分子式为C16H15N5·2HCl ,分子量为350.25,是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,灵敏度高于EB。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的大激发波长为340nm,大发射波长为488nm,DAPI和双链DNA结合后,大激发波长为364nm,大发射波长为454nm。Leagene DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,亦可以根据实验具体要求,稀释到相应浓度后进行染色,无需单独封片步骤。一般推荐工作浓度为0.5~10μg/ml。
DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)
注意事项:
DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)的浓度适用于绝大多数常规染色的需要。
荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
避免反复冻融,否则容易失效。
DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验;(2)DAPI工作液室温染色5~20分钟(可根据实验材料的染色结果而定);(3)PBS漂洗;(4)水溶性封片剂封片,游离细胞也可直接用含DAPI的PBS封片;(5)荧光显微镜观察。结果:正常的细胞核呈强荧光,细胞质无荧光;固定的组织细胞同样处理,亦可得到相似的染色结果。在有支原体污染的细胞质和细胞表面可见孤立的点状荧光,在感染痘苗病毒的细胞质中存在独特的“星状”荧光簇(star-like fluorescent clusters),腺病毒感染早期胞质中也可出现荧光。
DAPI Staining To visualize DNA, incubate fixed samples with 100 ng/ml 4',6'-diamidino-2-phenylindole hydrochloride (DAPI) in PBS for 30 min. Rinse 3x with PBTw. Materials PBS: Sambrook et al. (Molecular Cloning ). PBTw
DAPI Counterstaining Protocols
vi. Tap the tube to loosen the pellet and add 5 mL of PBS at room temperature. Allow the cells to rehydrate for 15 minutes. 2) Counterstaining Protocol i. Dilute the DAPI stock solution to 3 µM
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