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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
低温避光
- 规格:
100ml/500ml
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥75.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500ml | 产品价格: | ¥240.0 |
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文献和实验0.25%(W/V)考马斯亮蓝G溶液2.5ml,加12.%(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (6)稀染色液 取上述染色液2ml,加12.5%(W/V)三氯醋酸溶液至10ml。 (7)脱色液 7%醋酸溶液。 3.操作法 (1)制胶 取溶液A2ml,溶液B5.4ml,加尿素2.9g使溶解,再加水4ml,混匀,抽气赶去溶液中气泡,加0.56%过硫酸铵溶液2ml,混匀制成胶液,立即用装有长针头的注射器或细滴管将胶液沿管壁加至底端有橡皮塞的小玻璃管(10×0.5cm)中,使胶层高度达6~7cm
,分子又立即得到正电荷或负电荷,从而又向pI迁移。因此,这些分子总会是处于不断扩散和抗扩散的平衡中,在pI处得以“聚焦”. 二、仪器与试剂 1.材料:蛋白样品 2.试剂: 聚丙烯酰胺、甲乙聚丙烯酰胺、两性电解质、尿素、NP-40、teiton-100 电极液:1M磷酸(阳极液)、1M氢氧化钠(阴极液) 固定液:100g三氯乙酸、10g磺基水杨酸溶于500ml,定容为1000ml 染色液:0.35g考马斯亮蓝R-150溶于300ml脱色液中,加热到60-70℃,加入0.3g
完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析
地降低电洗脱过程中的蛋白质产率(表 27-2 和 图 27-2)。以 BSA 为例,我们发现其产率降低了 30%。固定处理导致的产率损失似乎对大分子质量蛋白质的作用更剧烈。对于磷酸酶 B 来说,当凝胶经过固定后蛋白质回收率下降了 89%。因此,去掉固定凝胶步骤对于从 SDS-PAGE 凝胶中回收的完整蛋白质有益。如果可能,应使用非固定的考马斯亮蓝染色。已有一些市售的基于考马斯亮蓝的胶体染色液,它们具有很好的灵敏度,而且对蛋白质没有或仅有很少的固定作用。这些染色液包括 Qbiogen 公司生产
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