尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)

特别提示：包括尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)
英文名称：Uracil DNA Glycosylase

产品货号：尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)
产品规格：500U

E.coli尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)催化尿嘧啶从含尿嘧啶的DNA上释放。UDG能有效地水解单链或双链DNA上的尿嘧啶，但不能从6碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。其反应原理图如下：


活性定义：1单位指每分钟催化60pmol尿嘧啶从含尿嘧啶的双链DNA上释放所需要的酶量。通过检测37℃条件下，30分钟从50μl含0.2μg DNA(10⁴～10⁵cpm/μg)的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。

产品应用：在37℃条件下，1单位UDG与0.1μg含尿嘧啶DNA温育10分钟后，此DNA不能再被DNA聚合酶复制。95℃加热10分钟可使该酶95%的活性丧失。由于95℃热处理后该酶仍有部分活性，建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物DNA的降解，也可以立即用酚/氯*抽提反应产物。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

备注：UDG在较广的pH范围内均有活性，最适pH是8.0，不需要二价阳离子。活性受高离子强度(＞200mM)所抑制。

除了尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG),，我公司还供应以下相关产品：



名称：ATP硫酸化酶
货号：BTN130660
规格：10U
ATP硫酸化酶催化硫酸根的活化，通过转移硫酸根至ATP的腺嘌呤单磷酸基团，形成腺苷-5´-磷酸硫酸(APS)和焦磷酸。这个反应是可逆的：ATP硫酸化酶也可以催化APS和焦磷酸合成ATP，后者可用于焦磷酸高通量DNA测序。

活性定义：1单位指40μL反应体系中，30℃条件下1分钟催化1μmol APS和焦磷酸转化成ATP所需的酶量。

活性检测条件：115mM Tris-HCl(pH8.0)，0.58mM β-NADP，2.4mM Mg acetate，34mM D-葡萄糖，0.3mM APS，3.4mM 焦磷酸，0.75units/mL己糖激酶和0.5 units/mL葡萄糖6-磷酸脱氢酶。

Buffer成分：10mM Tris-HCl(pH7.5)，50mM NaCl，0.1mM DTT，0.1mM EDTA，50% Glycerol。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

名称：AbaSI限制性内切酶
货号：SV0004
规格：1KU
特性:
重组酶，EpiMark验证
概述:
AbaSl 是一种 DNA 修饰依赖型核酸内切酶, 能够识别双链 DNA 中的 5-葡糖基羟甲基胞嘧啶
(ghmC)，并能在距修饰的胞嘧啶 3´ 侧 11-13 碱基处进行切割，形成一个 2-3 碱基的 3´ 突出末端。该酶只有在距修饰的胞嘧啶 3´ 侧 20-23 核苷酸处有一个鸟嘌呤基团存在时,才可以切割。AbaSl 也识别 5-羟甲基胞嘧啶(hmC)，但效率较低；不识别 5-甲基胞嘧啶(mC)或未修饰的胞嘧啶。
反应条件:
1X BalbBuffer 4，25℃ 温育。
热失活: 65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。

名称：CviAII限制性内切酶
货号：SV0294
规格：1KU|200U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，25℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性:20%。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
CviAll是Nlalll的不完全同裂酶。

名称：PaeR7I限制性内切酶
货号：SV0581
规格：10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
PaeR7l 与 Xhol的识别序列一致。但实验证明，CTCTCGAG 序列不能被 PaeR7l 切割。

名称：StyI-HF限制性内切酶
货号：SV0743
规格：15KU|3KU|1500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：T4 多聚核苷酸激酶
货号：SV1047
规格：2500U|500U|250U
特性:
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化，以便进行连接反应。
DNA 或 RNA 的末端标记，用作探针和进行 DNA 测序
用 T4 多聚核苷酸激酶（M0201）除去 3´ 磷酸基团
T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（M0236）将 3´ 端已经磷酸化的单核苷酸 5´ 磷酸化，制备pNp 底物，用于添加到 DNA 或 RNA的 3´ 端
用 T4 多聚核苷酸激酶（缺失 3´ 磷酸酶活性）（M0236）对 3´ 端有磷酸基团的寡核苷酸的 5´ 端进行标记
概述:
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
来源:
重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶或修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
反应条件:
1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液
[70 mM Tris-HCl（pH 7.6 @ 25℃），10 mM MgCl2，5 mM DTT]，37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
注意事项:
达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应:
50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们咨询。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（W/V）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应:，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
质保声明:
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。
浓度:
10,000 units/ml。