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- 百奥莱博
- HR8005-QYS
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
334
- 英文名：
Cell membrane / cytoplasm / nuclear membrane protein stepwise Extraction Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
蛋白酶抑制剂-20℃保存；磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白提取液2-8℃
- 规格：
50T/100T
特别提示：包括细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒
英文名称：Cell membrane / cytoplasm / nuclear membrane protein stepwise Extraction Kit
产品货号：HR8005
产品规格：50T/100T
细胞膜蛋白/胞浆蛋白/核膜蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中分步提取细胞膜蛋白/胞浆蛋白/细胞核膜蛋白/核内蛋白。提取过程简单方便，可在2小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
储存条件：蛋白酶抑制剂-20℃保存；磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白提取液2-8℃保存。
有效期：一年。
注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点：
1．使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用方法：
使用注意事项：
1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
蛋白提取步骤：
1．提取液制备：每400μl冷的蛋白提取液A/D中加入分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物和2μl磷酸酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取5-10×106个细胞①，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，用细胞刮刀收集细胞。(组织样本50-100mg 剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨)，冰上静置5分钟，小心将匀浆吸入另一预冷的干净离心管。在4℃，500g条件下离心2-3分钟，弃上清。)
3．用冷PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每5×106个细胞中加入400μl冷的蛋白提取液A，混匀后，在4℃条件下用试剂盒所配针筒反复吸吹细胞，使细胞完全破裂。
5.在4℃，1000g条件下离心5分钟。
6．快速将上清(I)吸入另一预冷的干净离心管，在沉淀中加入200μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒。
7．将混匀的提取液B 置2-8℃振荡1-2小时，至沉淀充分裂解，沉淀明显减少。
8．37℃水浴10分钟，37℃下②1000g-2000g 力离心5分钟，此时溶液分为两层(对着光线看)，上层为核内蛋白，下层是核膜蛋白约为20-40μl。小心移除上层，用1-2倍体积的提取液D溶解下层即为细胞核膜蛋白。
9.在步骤6中所得到的上清(I)中加入5μl提取液C，充分混匀。37℃水浴10分钟。
10．37℃下② 1000g离心3分钟，此时溶液分为两层(对着光线看)，上层是胞浆蛋白部分，下层是细胞膜蛋白部分约为40-50μl。
11．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白。
12．用80-200μl冰冷的提取液D溶解步骤10中的下层部分，即得细胞膜蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量③后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验④。
注：
①细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
② 必需保证在37℃左右下离心，至少确保30℃以上。无可控温的离心机时，用常温的离心机在室温离心即可，适当缩短离心时间至2-3分钟。
③ 建议用BCA 法进行蛋白定量。
④蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
除了细胞膜/胞浆/核膜蛋白分步提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN140652 | 30mL亲和层析柱 | 30mL |
| YT611 | RIPA裂解液(弱) | 100ml |
| SNM432 | WB洗涤液(10×) | 100ml |
| SNM447 | 彩虹预染蛋白Marker(10-170KD) | 250ul |
| SNM495 | 多聚赖氨酸 | 10ml |
| ALH381 | 加热型考马斯亮兰快速染色液 | 500ml|2000ml |
| KFS038 | kFluor350标记抗兔免疫荧光染色试剂盒 | 300T |
| KFS064 | WB抗体清除液(强碱性) | 500ml |
| KFS096 | 蛋白提取及SDS PAGE凝胶电泳试剂盒 | 25T |
| SY0304 | *基苯基聚乙二醇 | 100ml |
| SY0309 | 曲拉通X-114(分子生物学级) | 500ml |
| SY0345 | 考马斯亮蓝快速染色液(8分钟) | 1L |
| SY0372 | 8%预制胶，12孔 | 1盒（10块） |
| SY0387 | 透明质酸酶 | 100mg |
| SY0428 | T7 Tag多肽 | 5mg |
| QN1168 | 4×蛋白上样缓冲液(含DTT) | 10ml |
| QN1229 | SABC免疫组化试剂盒(兔IgG)(POD显色) | 100T |
| QN1237 | 1×TBST缓冲液 | 500ml |
| HR8033 | 细菌蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用) | 50T/100T |
| HR8170 | 细胞筛(100μm) | 1个 |
| GL2933 | AL蛋白酶抑制剂混合液(1mg/ml) | 1ml |
| GL1447 | CL蛋白酶抑制剂混合液(1mg/ml) | 1ml |
| GL1490 | 双缩脲蛋白定量试剂盒 | 500T|1000T |
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文献和实验：主要由微滴板载盒、滑板、传动带、滑轨和走板电机等组成。磁力传动可提高整机的密封性，微滴板载盒与其驱动机构之间由机壳左部的导板完全隔离。在磁力作用下，微滴板载盒在机壳左部的导板内来回运动，完成微滴板载盒的进退功能。 （3）压力和真空单元：主要由真空／压力泵、真空管路、压力管路、电磁阀、洗液瓶和废液瓶等组成。 （4）电源开关、处理器控制单元及外设：电源开关为电磁阀、升降电机，提供直流电源。处理器系统由单片机、程序存储器、数据存储器及相应的锁存译码芯片构成，通过I／O接口来控制键盘和显示屏等外设
细胞核蛋白质提取试剂盒 Nucleoprotein Protein Extraction Kit 产品说明：本试剂盒提供独特的组份，采用特殊的非离子型去污剂，以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂，能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞，经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白，释放的细胞核能够保持完整，再用Lysis Buffer对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性，因此该产品可合适用于SDS-PAGE电泳、Western Blot、免疫共沉淀，EMSA
主要产品 :1.蛋白提取试剂盒I(实体组织和细胞总蛋白提取)2.蛋白抽提试剂盒-II (液体样品蛋白抽提和回收)3.核-胞浆蛋白制备试剂盒4.变性/非变性细胞裂解产物制备试剂盒5.非变性裂解液6.变性裂解液具体介绍:1.蛋白抽提试剂盒 -I (实体组织和细胞蛋白抽提,100 extractions)P1250 50 次提取 286元100次提取 520元描述：实体组织如大脑富含磷脂、神经纤维或血管壁含大量结缔组织、而脂肪则有大量油脂，常规方法难以有效从这些组织提取蛋白。蛋白抽提试剂盒-I用于
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