线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒

特别提示：包括线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒
英文名称：Mitochondrial / cytoplasmic protein extraction kit

产品货号：线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒
产品规格：50T/100T

我司线粒体蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取线粒体蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便。制备的线粒体蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于WesternBlotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
本试剂盒提取的蛋白不可用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳，请使用货号HR0191的试剂盒。

储存条件：线粒体试剂A和B于2-8℃保存，长期存放于-20℃保存；试剂C和D2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2．将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
● 最好使用 Dounce匀浆器匀浆，如果没有Dounce匀浆器，用普通1ml 玻璃匀浆器匀浆也可。也可采用超声破碎的方法，建议功率30w，10s。采用普通匀浆器或超声破碎，建议镜检，保证细胞80%以上的破碎率。
● 每 200μl试剂C和试剂D 加入2μl蛋白酶抑制剂混合物混匀备用。

1．取1-2×107个细胞①，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2．用冷PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3．加入200μl冷的试剂A，置冰上10分钟。
4．Dounce匀浆器匀浆30-40 下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6．在 4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
7．取步骤 6的上清于另一干净离心管中，加入200μl试剂C 混匀，在4℃，11000×g以上条件下离心5分钟，取上清，即得胞浆蛋白。
8.在步骤 6的沉淀中加入200μl冷的试剂B，混匀。
9.在 4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。
10．弃上清。
11.在沉淀中加入 80μl-150μl试剂D，置冰上20分钟，每隔5分钟高速涡旋振荡15秒。
12．即得线粒体蛋白。
13．将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注：
①细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
② 建议用BCA 法进行蛋白定量。
③蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

除了线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒
货号：YT048
规格：可制30-50块胶
本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制SDS-PAGE胶(即SDS聚丙*酰胺凝胶)。 本试剂盒中把凝胶配制所需的缓冲试剂、SDS等预混合成下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)，简化了凝胶配制的步骤。下层胶缓冲液中含Tris pH8.8及适量SDS，上层胶缓冲液中含Tris pH6.8及适量SDS。本试剂盒约可配制30-50块常规大小的PAGE胶。

产品组份：
30% Acr-Bis (29:1)————100ml
下层胶缓冲液(4X)————70ml
上层胶缓冲液(4X)————30ml
过硫酸*(代"铵")————————0.5g
TEMED—————————0.5ml

注意事项：
1. 过硫酸*(代"铵")配制成10%溶液后，应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。
2. TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3. 温度较低时，下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)中的SDS可能析出。此时需水浴温育，并在完全溶解和混匀后使用。
4. TEMED易燃，有腐蚀性，请注意防护。

储存条件：4℃，有效期6个月。

名称：4％多聚甲*
货号：QN1252
规格：100mL|500mL
多聚甲*是免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学(ICC)研究中最常用的固定剂之一。该固定剂较为温和，能很好地保存组织的抗原性和细微结构，适于组织标本和细胞片的较长期保存，非常适合组织和细胞的光镜免疫化学研究。

本产品为4%多聚甲*的PBS溶液，可直接用于组织和细胞固定。若需使用其他低浓度多聚甲*，可使用0.01M PBS按比例稀释。

使用说明：
组织固定：室温或4℃浸泡固定2-24h，用缓冲液漂洗后即可树脂包埋用于组织切片。
切片固定：室温或4℃固定10min-2h，视切片厚度而定，用缓冲液漂洗后即可用于染色。
细胞固定：室温或4℃固定10-30min，用缓冲液漂洗后即可用于染色。

注意事项：
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品不含防腐剂，不宜室温或4℃长期保存，请勿反复冻融。

储存条件：-20℃

名称：丝状真菌蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
货号：HR0197
规格：50T/100T
丝状真菌蛋白提取试剂盒(二维电泳用)适用于从各种丝状真菌中提取总蛋白。
优化的裂解液配方可以充分释放各种有隔膜菌丝和无隔膜菌丝蛋白以及各种菌丝变态体蛋白，提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于二维电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系本公司，选择其他货号产品。

储存条件：蛋白酶抑制剂-20℃保存；蛋白提取液室温保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．提取液制备：每 500μl丝状真菌蛋白提取液中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取培养丝状真菌，在 4℃，3000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集菌体。
3．用冷 PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．将菌体置于研钵中用液氮研磨 15分钟左右至粉末。若无液氮研磨条件，可直接用蛋白提取液研磨。
5．每 100mg菌体中加入500μl蛋白提取液，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
6．在 4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
7．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到真菌总蛋白。
8．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。
注：
① 菌体数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
②蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。